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    13．新一代基因编辑工具由 Cas9（一种限制性核酸内切酶）和向导 RNA 构成．该复合体能与 DNA 分子上的特定序列结合，并在合适位点切断 DNA 双链（如图所示）．DNA 被切断后，细胞会启动 DNA 损伤修复机制，在此基础上如果为细胞提供一个修复模板，细胞就会按照提供的模板在修复过程中引入片段插入或定点突变，从而实现基因编辑．

    请回答：
    （1）在将编码 Cas9 的基因导入真核细胞的转基因操作中，若控制合成 Cas9 的基因序列已知，可用化学方法合成目的基因，再构建含目的基因的重组DNA分子导入真核细胞，该过程中需要使用的酶是C（A．限制性核酸内切酶B．DNA 连接酶  C．限制性核酸内切酶和 DNA 连接酶D．DNA 聚合酶）．上述转基因操作成功的标志
    控制Cas9基因的表达成功．
    （2）如图所示，基因编辑工具发挥作用时，向导 RNA 分子的序列与基因组 DNA 中特定碱基序列因为碱基序列互补所以能结合在一起，然后由 Cas9 催化磷酸二酯键键断裂，从而使 DNA 分子断裂．
    （3）一般来说，在使用基因编辑工具对不同基因进行编辑时，应使用 Cas9 和不同（填“相同”或“不同”）的向导 RNA 进行基因的相关编辑．

    分析 1、中心法则：（1）遗传信息可以从DNA流向DNA，即DNA的复制；（2）遗传信息可以从DNA流向RNA，进而流向蛋白质，即遗传信息的转录和翻译．后来中心法则又补充了遗传信息从RNA流向RNA以及从RNA流向DNA两条途径．
    2、基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的获取，②基因表达载体的构建，③将目的基因导入受体细胞，④目的基因的检测与鉴定．

    解答 解：（1）若控制合成 Cas9 的基因序列已知，可用化学方法合成目的基因，再构建含目的基因的重组DNA分子导入真核细胞，该过程中需要使用限制性核酸内切酶和DNA 连接酶．上述转基因操作成功的标志控制Cas9基因的表达成功．
    （2）如图所示，CRISPR/Cas9系统发挥作用时，sgRNA分子的序列与基因组DNA中特定碱基序列因为碱基序列互补所以能结合在一起．要使DNA分子断裂，需要由Cas9催化脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键水解．
    （3）根据碱基互补配对原则，在使用CRISPR/Cas9系统对不同基因进行编辑时，应使用Cas9和不同的sgRNA进行基因的相关编辑．
    故答案为：
    （1）化学  含目的基因的重组DNA分子  C   控制Cas9基因的表达成功
    （2）碱基序列互补    磷酸二酯键
    （3）不同

    点评 本题考查了基因工程的有关知识，要求考生能够掌握基因工程的操作步骤，识记基因工程的操作工具，能够结合图示以及所学知识准确答题，难度适中．

    练习册系列答案
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    6．在探究某品牌加酶洗衣粉适宜的洗涤温度时，不必考虑（　　）
    A．实验设计的温度范围是否符合生活实际
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    C．洗衣粉用量、洗涤方式及时间、洗涤后漂洗方式
    D．使用普通洗衣粉和不加洗衣粉进行同样方式的洗涤

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    （1）如果在图中d处给予一个刺激后，观察e处电流计指针的偏转情况，应该是两次相反方向的偏转，此时产生的兴奋传到骨骼肌引起的收缩不属于反射，原因是没有中枢系统的参与（或没有通过完整的反射弧）．
    （2）图中b处的突触后膜受到某种递质的作用后，细胞膜对Cl-的通透性增加，造成Cl-内流，这时膜内外的电位与没受到该递质刺激前的静息状态相比，所发生的变化是外正内负的电位差变大．图中c处突触后膜上的受体与b处突触后膜上的受体种类不同（填“相同”或“不同”），判断的依据是屈腿反射发生时，屈肌收缩而伸肌舒张．

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    1．在探究不同浓度的 2，4-D 溶液对插枝生根作用的实验中，下列属于因变量的是（　　）
    A．扦插枝条上芽的数量B．2，4-D 溶液的浓度
    C．2，4-D 溶液处理插枝的时间D．插枝生根的总长度

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    A．用红色橡皮泥和蓝色橡皮泥制作的二种染色体分别表示来自不同亲本
    B．两条颜色长短一样的染色单体中部用一根铁丝扎起来，铁丝代表着丝粒
    C．演示减数分裂过程最少需要红色橡皮泥和蓝色橡皮泥制作的染色体各一条
    D．在纸上画减数第一次分裂和减数第二次分裂的两个纺锤体要相互垂直

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    18．多种微生物在中国的传统发酵技术中得到利用，请回答下列问题：
    （1）制作果酒果醋的两类微生物分别是酵母菌和醋酸杆菌．果醋制作过程中菌种的呼吸方式是需氧型（或“有氧呼吸型”）．
    （2）制作腐乳的微生物主要是毛霉，发挥作用时主要利用其产生的蛋白酶和脂肪酶．
    （3）利用乳酸菌进行酸奶制作时杀菌很重要，牛奶一般用巴氏消毒法，所用仪器如接种环常用灼烧灭菌法．
    （4）乳酸菌也常用于泡菜的制作，腌制泡菜过程中亚硝酸盐含量的变化是先增加后减少．

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    5．高浓度酒精会抑制酵母菌活性，因而在米酒制作中，要筛选耐酒精能力较强和发酵性能优良的酵母菌．回答下列问题：
    （1）为了解发酵液中酵母菌的数量，可采用稀释涂布平板法接种．若将1mL发酵液稀释105倍，在三个平板上分别接入0.2mL稀释液，经适当培养后，三个平板上的菌落数分别为33、38、37，则1mL发酵液中有1.8×107个酵母菌．
    （2）若用同一套装置和材料进行果酒、果醋发酵实验，应先进行果酒（填“果酒”或“果醋”）发酵．用重铬酸钾检测酒精，在酸性条件下呈现灰绿色．
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    第一步：将等量的三种品系酵母菌分别接种在酒精浓度为6%、8%、10%、12%的液体培养基中．
    第二步：使用一定的方法收集各组酵母菌产生的气体，记录产气量，比较三种品系酵母菌耐酒精能力．
    （4）发酵性能测定：将三种品系酵母菌分别接种于含有相同发酵液的发酵瓶后，称重发酵瓶．称前拧松瓶盖，轻轻摇晃瓶子．随着发酵时间的延续，瓶重逐渐减轻．测定结果如图所示．
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    C．将涂有口腔上皮细胞的载玻片烘干后滴加健那绿染液用于观察线粒体
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    A．抗体的化学本质主要是蛋白质，少部分是RNA

    B．人体的抗体主要分布在血清中，在组织液和外分泌液中也有

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