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12.2016年2月,中、美两国科学家宣布发现了PYL9蛋白(一种位于细胞膜上的脱落酸受体,可提高植物的抗旱性能),利用转基因技术让水稻自身产生大量PYL9蛋白,可显著提高其抗旱性.请回答:
(1)干旱环境中水稻老叶内脱落酸的含量增加(填“增加”或“减少”),加速(或促进)老叶的衰老与脱落,将节省的水分和养料转移到幼叶和芽中,提高了幼叶和芽的存活率.
(2)老叶细胞膜上的PYL蛋白可以与脱落酸识别并结合,引发老叶的衰老与脱落.
(3)已知PYL9蛋白的氨基酸序列,培育转基因抗旱水稻可用人工合成法来获得PYL9基因,构建的基因表达载体上除了含PYL9基因、标记基因、复制原点等序列外,还必须含有启动子、终止子等调控PYL9基因表达的序列.
(4)将基因表达载体导入水稻细胞最适宜的方法是农杆菌转化法,导入目的基因的重组细胞可通过植物组织培养技术培育成完整植株.
(5)检测水稻细胞是否含有PYL9基因常用的方法是DNA分子杂交,该方法常用的分子工具是DNA分子探针,检测水稻细胞中是否存在PYL9蛋白,在分子水平上采用的方法是抗原一抗体杂交.

分析 1、基因工程的操作工具包括限制酶、DNA连接酶、运载体,工具酶包括限制酶和DNA连接酶.
2、目的基因获取的方法:从基因文库中获取、PCR技术扩增、人工合成.
3、目的基因的检测和表达
首先要检测:转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因,方法是采用 DNA分子杂交技术.
其次还要检测:目的基因是否转录出了mRNA,方法是采用用标记的目的基因作探针与 mRNA杂交.
最后检测:目的基因是否翻译成蛋白质,方法是从转基因生物中提取 蛋白质,用相应的 抗体进行抗原-抗体杂交.
有时还需进行:个体生物学水平的鉴定.如 转基因抗虫植物是否出现抗虫性状.

解答 解:(1)干旱环境中水稻老叶内脱落酸的含量增加,脱落酸与PYL9蛋白结合,能加速老叶的衰老与脱落,将节省的水分和养料转移到幼叶和芽中,增强了幼叶和芽的存活率.
(2)PYL9蛋白是位于细胞膜上的一种脱落酸受体,因此老叶细胞膜上的PYL蛋白可以与脱落酸识别并结合,引发老叶的衰老与脱落.
(3)在已知PYL9蛋白的氨基酸序列,可以推测基因的脱氧核苷酸序列,因此培育转基因抗旱水稻可用人工合成方法来获得目的基因.基因表达载体的组成包括目的基因(PYL9基因)、标记基因、复制原点、启动子和终止子等.
(4)将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法;将转基因植物细胞培育成转基因植株需要采用植物组织培养技术.
(5)检测目的基因是否导入受体细胞常用DNA分子杂交技术,该方法常用的分子工具是探针;检测水稻细胞中是否存在PYL9蛋白,在分子水平上采用的方法是抗原-抗体杂交法.
故答案为:
(1)增加    加速(或促进)
(2)脱落酸
(3)人工合成    启动子、终止子
(4)农杆菌转化法    植物组织培养
(5)DNA分子杂交    DNA分子探针    抗原一抗体杂交

点评 本题考查了基因工程和细胞工程的有关知识,要求考生能够识记基因工程的操作工程和操作步骤,掌握目的基因检测和鉴定的方法,并能够根据题干信息准确答题.

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