Question

14．土壤农杆菌侵染植物细胞时，Ti质粒上的T-DNA片段转入植物的基因组．利用农杆菌以Ti质粒作为运载体进行转基因，下列相关叙述正确的是（　　）

• A． 目的基因应插入T-DNA片段外，以防止破坏T-DNA
• B． 用Ca²⁺处理农杆菌，以利于其侵染植物细胞
• C． Ti质粒是一种环状DNA分子，属于细菌的拟核DNA
• D． T-DNA片段有利于介导外源DNA整合到植物的染色体

Answer 1

分析 农杆菌转化法（约80%的转基因植物都是用这种方法获得的）
1、农杆菌转化法的具体过程：
（1）利用土壤的Ti质粒构建基因表达载体，即将目的基因整合到土壤农杆菌的Ti质粒上．
（2）将整合了目的基因的Ti质粒导入土壤农杆菌细胞内．
（3）利用土壤农杆菌感染植物细胞，该过程实际上是将含有目的基因的土壤农杆菌Ti质粒导入植物细胞内．
（4）含有目的基因的土壤农杆菌Ti质粒进入植物细胞后，可以把自己的一段基因整合到细胞核中的染色体上，这段基因中包含了目的基因．
2、原理：农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上．根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上．
3、农杆菌特点：易感染双子叶植物和裸子植物，对单子叶植物没有感染力；Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上．
4、转化：目的基因插人Ti质粒的T-DNA上 农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达．

解答 解：A、在农杆菌转化法中，需要将目的基因插入但T-DNA片段上，A错误；
B、农杆菌转化法中不需要用Ca²⁺处理农杆菌，应直接利用土壤农杆菌感染植物细胞，B错误；
C、Ti质粒是一种环状DNA分子，是存在于细菌细胞质中的DNA，C错误；
D、T-DNA片段有利于介导外源DNA整合到植物的染色体，D正确．
故选：D．

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作工具、操作步骤，掌握各步骤中需要注意的细节问题，能结合所学的知识准确答题．