Question

9．人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得．流程如图：

（1）检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用DNA分子杂交（或核酸探针）技术．
（2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其超数排卵．图中早期胚胎可用人工方法从羊输卵管内获得，该过程称为冲卵（或冲胚）； 也可从羊体内取出卵子，通
过体外受精（或核移植）后进行早期胚胎培养获得． 第5天右以看到胚胎发生收缩，细胞间隙扩大，接着胚胎内部出现裂隙，这是胚胎囊胚期开始的标志．
（3）利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体．图中早期胚胎通过胚胎移植技术移入代孕母羊子宫内继续发育，暂不移入的胚胎可使用冷冻（或低温）方法保存．
（4）胚胎干细胞（ES）可由早期胚胎或者原始性腺中分离培养获得的一类细胞．

Answer 1

分析 1、DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体．
2、目的基因分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．
3、该基因工程需要对羊的性别进行选择，由于只有母羊能够分泌乳汁，因此选择母羊的胚胎进行移植．

解答 解：（1）检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用DNA分子杂交（或核酸探针）技术．
（2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其超数排卵．图中早期胚胎可用人工方法从羊输卵管内获得，该过程称为冲卵（或冲胚）； 也可从羊体内取出卵子，通
过体外受精（或核移植） 后进行早期胚胎培养获得． 第5天右以看到胚胎发生收缩，细胞间隙扩大，接着胚胎内部出现裂隙，这是胚胎囊胚期开始的标志．
（3）利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的全能性．图中早期胚胎通过胚胎移植技术移入代孕母羊子宫内继续发育，暂不移入的胚胎可使用冷冻（或低温）方法保存．
（4）胚胎干细胞（ES）可由早期胚胎或者原始性腺中分离培养获得的一类细胞．
故答案为：
（1）DNA分子杂交（或核酸探针）
（2）超数排卵   冲卵（或冲胚）  体外受精（或核移植）  囊胚
（3）胚胎分割  冷冻（或低温）
（4）早期胚胎或者原始性腺

点评 本题考查了基因工程和胚胎工程的相关知识，要求考生能够识记基因工程的操作步骤，明确该基因工程中需要选择母羊进行胚胎移植；识记胚胎工程的相关技术及应用，能结合所学的知识准确答题，属于考纲中识记、理解层次的考查．