Question

【题目】抗体是一种由浆细胞分泌，被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的一类蛋白质。下列是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图

（1）在制备抗体1的过程中，先给小鼠注射一种纯化的抗原蛋白，一段时间后，从小鼠的_________ (填“骨髓”或“脾脏”)中获取B淋巴细胞，将获得的细胞与________细胞融合，再经过筛选、检测，最终可获得所需的Y细胞。

（2）在制备抗体2的过程中，构建基因表达载体的目的是________________________。导入到大肠杆菌细胞中的鼠基因能表达出相应的蛋白质，原因是______________________。

（3）抗体2制备过程中将mRNA逆转录为cDNA再进行PCR扩增被称为RT-PCR技术，RT-PCR过程需要的酶有______________。将V1基因与普通质粒经某种限制酶切割连接并成功导入大肠杆菌细胞后，发现仍有部分细胞不能表达出抗体2，最可能的原因是_______。

（4）可用______________法检测受体细胞中是否真正成功表达了病毒S蛋白。上述制备抗体1和2过程中用到的现代生物技术手段主要有_______________________________。

Answer 1

【答案】 脾脏 骨髓瘤 使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代 所有生物共用一套遗传密码 逆转录酶和Taq酶 目的基因与质粒载体反向拼接 抗原―抗体杂交 生产单克隆抗体、基因工程

【解析】

据图分析，细胞A表示效应B细胞（浆细胞），细胞Y表示杂交瘤细胞，①过程表示动物细胞融合，②过程表示动物细胞培养，③过程表示提取信使RNA，④过程表示逆转录，⑤表示基因表达载体的构建，⑥表示将重组质粒导入受体细胞。

（1）在制备单克隆抗体的过程中，B淋巴细胞（浆细胞）是从已免疫的小鼠脾脏中提取的；Y细胞是可以分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，是浆细胞与骨髓瘤细胞融合、筛选获得的。

（2）图中抗体2是通过基因工程技术获得的，该过程中构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代；导入到大肠杆菌细胞中的鼠基因能表达出相应的蛋白质，说明不同的生物是共用一套遗传密码的。

（3）将mRNA逆转录为cDNA的过程需要逆转录酶的催化；PCR技术扩增目的基因需要Taq酶的催化。根据题意，将目的基因与质粒连接后导入大肠杆菌后，有部分细胞不能产生抗体2，可能是因为目的基因与质粒载体反向拼接，导致其不能正确表达。

（4）基因表达的产物是蛋白质，可以用抗原抗体杂交法进行检测；图示制备抗体的过程涉及到的现代生物技术有基因工程、动物细胞融合技术、动物细胞培养技术等。