Question

【题目】下图是将乙肝表面抗原基因转移到烟草细胞内生产乙肝疫苗的示意图，请据图回答下列问题。

（1）过程①表示_________。为了使目的基因正常表达，其首端必须有启动子，它是___________的部位。若限制酶切出了平末端，要选择___________进行连接。（填“E·coliDNA连接酶”或“T4DNA连接酶”）

（2）图中将乙肝表面抗原基因导入烟草细胞的方法称为____________________。它是利用运载体Ti质粒中含有___________序列，可以将目的基因整合到宿主细胞的染色体上。

（3）图中将乙肝表面抗原基因导入烟草细胞后，长芽、生根的过程中采用了细胞工程的___________技术，该技术的原理是______________________。

（4）检测烟草植株细胞中乙肝表面抗原基因是否合成出乙肝表面抗原蛋白，采用的方法是_____________。

Answer 1

【答案】 基因表达载体的构建 RNA聚合酶识别 结合T4DNA连接酶 农杆菌转化法 T-DNA 植物组织培养 植物细胞具有全能性 抗原一抗体杂交法

【解析】试题分析：图示中①为基因表达载体的构建，②为目的基因的导入过程，因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

（1）据图示可知，过程①表示基因表达载体的构建，启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，RNA聚合酶与其结合后可以驱动基因的转录。为了使目的基因正常表达，其首端必须有RNA聚合酶识别和结合的部位，即启动子，若限制酶切出了平末端，要选择T4DNA连接酶进行连接。

（2）将目的基因进入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法，故将乙肝表面抗原基因导入烟草细胞的方法称为农杆菌转化法。它是利用运载体Ti质粒中含有T﹣DNA序列，可以将目的基因整合到宿主细胞的染色体上。

（3）图中将乙肝表面抗原基因导入烟草细胞后，需要采用了细胞工程的植物组织培养技术让其生根、长芽，该技术的原理是植物细胞具有全能性。

（4）检测乙肝表面抗原基因是否翻译出乙肝抗原蛋白，检测的方法是抗原﹣抗体杂交。