【题目】单克隆抗体在诊断和治疗中具有广泛的应用。已知一般细胞的DNA合成途径有起始合成途径和中间合成途径两种，氨基蝶呤（A）可以阻碍起始合成途经，次黄嘌呤（H）及胸腺嘧啶核苷（T）则是中间合成途径所必需的物质。骨髓瘤细胞只有起始合成途径。在HAT培养基中含有次黄嘌呤（H）、氨基蝶呤（A）及胸腺嘧啶核苷（T）。下面是制备单克隆抗体的基本步骤：
步骤1：对小鼠多次注射特定抗原，制备淋巴细胞。
步骤2：细胞融合与杂交瘤细胞的选择性培养。最后一次免疫后第3天制备脾细胞悬液；筛选出？途径缺失的骨髓瘤细胞，于对数生长期（又称指数生长期，即细胞以指数形式增加）制备骨髓瘤细胞悬液；取适量的脾细胞与骨髓瘤细胞进行混合，对它们进行诱导融合处理；用HAT培养基对处理后的细胞进行培养。
步骤3：二次筛选。
步骤4：大规模培养杂交瘤细胞，批量生产单克隆抗体。
回答下列问题：
（1）步骤1中对小鼠多次注射特定抗原的目的是________________________；实验所需淋巴细胞可由________________细胞增殖分化而来。
（2）于对数生长期制备骨髓瘤细胞悬液的原因是________________________________；为使HAT培养基上只有杂交瘤细胞可以存活，步骤2中应填________。
（3）步骤3中二次筛选可通过________________________法进行目的抗体的检测，筛选出________________细胞。
（4）在体外对杂交瘤细胞进行克隆化培养时，为维持无菌无毒的环境，应进行的操作是_______________________________________________________________________。实验发现，在杂交瘤细胞的体外培养过程中，加入饲养层细胞比不加的生长要好，可能的原因是________________________________________。
【答案】增加相应B淋巴细胞的数量 B细胞和记忆 对数期的细胞增殖速率较快 中间合成 抗原—抗体杂交 目的抗体检验呈阳性的杂交瘤（能够分泌目的抗体的杂交瘤） 对培养液和所有培养用具进行无菌处理，在培养液中加入一定量的抗生素、定期更换培养液 饲养层细胞可以产生一些促生长因子
【解析】
1.动物细胞培养条件
（1）无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进行无菌处理，通常还要在培养液中加入一定量的的抗生素，以防被污染。此外应定期更换培养液，以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害；
（2）营养物质：无机物(无机盐、微量元素等)，有机物(糖、氨基酸、促生长因子等)血清和血浆 (提供细胞生长必须的营养成份)；
（3）温度和pH(36.5±0.5℃，7.2~7.4)；
（4）气体环境(95%的空气+5%CO2的混合气体)其中5%CO2气体是为保持培养液的pH稳定。
2.单克隆抗体制备的原理：
B淋巴细胞在抗原的刺激下，能够增殖、分化形成分泌特定抗体的效应B细胞。B细胞的这种能力和量是有限的，不可能持续分化增殖下去，因此产生免疫球蛋白的能力也是极其微小的。将这种B细胞与非分泌型的骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，再进一步克隆化，这种杂交瘤细胞既能无限增殖，又能分泌特异性抗体，将这种克隆化的杂交瘤细胞进行培养或注入小鼠体内即可获得大量的高效价、单一的特异性抗体。这种技术即称为单克隆抗体技术。
（1）制备单克隆抗体的前提是首先获得效应B细胞，为了获得更多的相应的B淋巴细胞，实验中需要对小鼠多次注射特定抗原；实验所需的效应B细胞可由B细胞和记忆细胞在抗原的刺激下增殖分化而来。
（2）因为处于对数期的细胞增殖速率较快，适应新的培养环境的能力强，因此选择处于对数生长期制备骨髓瘤细胞悬液用于实验；一般细胞的DNA合成途径有起始合成途径和中间合成途径两种，而骨髓瘤细胞只有起始途径，为了将杂交瘤细胞选出来，在步骤2中应选择中间合成途径缺失的骨髓瘤细胞，在HAT培养基上杂交瘤细胞能利用效应B细胞的中间途径进行增殖。因为在HAT培养基中阻断了DNA合成的起始途径，骨髓瘤细胞以及骨髓瘤细胞自融的细胞因为起始途径被阻断而无法增殖。效应B细胞以及效应B细胞互融的细胞没有增殖能力。
（3）步骤3中二次筛的目的是要筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，通常可根据抗原抗体能够发生特异性结合的方法来检测，即用抗原—抗体杂交法进行目的抗体的检测，从而将能够分泌目的抗体的杂交瘤细胞筛选出来。
（4）动物细胞培养需要在无菌、无毒的环境中进行，因此，在体外对杂交瘤细胞进行克隆化培养时，需要对培养液和所有培养用具进行无菌处理，并同时在培养液中加入一定量的抗生素以维持无菌、无毒环境，具体培养过程中还需要定期更换培养基。实验中发现，在杂交瘤细胞的体外培养过程中，加入饲养层细胞比不加的生长要好，根据动物细胞培养的条件可知，加入饲养层细胞生长好的可能原因是饲养层细胞可以产生一些促生长因子。
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【题目】以下有关实验操作和应用的说法，错误的是（ ）
A.可用苏丹Ⅲ染液鉴定花生子叶中的油脂
B.观察滤纸条上色素带的间隔距离可判断四种色素的含量
C.观察植物细胞有丝分裂实验的步骤依次为：解离→漂洗→染色→制片
D.模拟孟德尔一对相对性状的杂交实验时，代表F1的信封中可放入“黄Y”和“绿y”的卡片10张
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【题目】随着骑行热潮的涌起，骑行已成为众多有氧运动爱好者的选择。有氧运动是增进健康的主要方式之一，下列有关分析错误的是（ ）
A.有氧运动过程中甲状腺激素的分泌量可能增加
B.有氧运动过程中抗利尿激素的释放量可能增加
C.有氧运动过程中运动系统活动增强，机体产热大于散热
D.有氧运动过程中调节方式主要是神经—体液调节
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【题目】正常人体细胞内不会发生的物质运输过程是（ ）
A.CO2顺浓度梯度从线粒体进入细胞质基质
B.葡萄糖借助载体从肝脏细胞进入组织液
C.RNA聚合酶通过核孔从细胞质进入细胞核
D.胰蛋白酶通过囊泡从胰岛细胞内运输到细胞外
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【题目】下列关于建立cDNA文库过程的叙述中，不正确的一项是
A. 从特定组织或细胞中提取DNA或RNA
B. 用逆转录酶合成mRNA的互补单链DNA
C. 以新合成的单链DNA为模板合成双链DNA
D. 新合成的双链DNA需要连接在运载体上
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【题目】在果酒、果醋和泡菜制作中，下列有关叙述正确的是
A.果醋发酵阶段应封闭充气口，防止杂菌进入
B.泡菜发酵中期乳酸菌大量繁殖产生乳酸能抑制杂菌繁殖
C.用自然菌种发酵酿酒时，需将装好新鲜果汁的发酵瓶高压蒸气灭菌
D.可以直接根据泡菜汁颜色的深浅估测出泡菜中亚硝酸盐含量的高低
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【题目】紫杉醇是一种高效、低毒、广谱的天然抗癌药物。利用红豆杉细胞培养生产紫杉醇是最有可能解决紫杉醇药源紧缺问题的途径。科学家经过多年研究，终于成功利用生物技术人工合成出大量的紫杉醇。
（1）通过_______法和放在_____（较高渗/较低渗）条件下能制备出红豆杉细胞的原生质体。
（2）将紫杉醇合成的关键酶基因导入红豆杉原生质体中，再生出细胞壁，与再生细胞壁直接相关的细胞器是________。将转基因成功的细胞作为_________，接种到MS培养基上。在MS培养基中，往往还要添加___________，促进细胞分裂和愈伤组织形成。愈伤组织细胞的特点是____________，并能产生紫杉醇。
（3）紫杉醇可以使细胞内的微管蛋白和组成微管的微管蛋白二聚体失去动态平衡，导致细胞在有丝分裂时不能形成______________，进而抑制了细胞分裂和增殖，使癌细胞停止在有丝分裂________期, 直至细胞凋亡，起到抗癌作用。
(4) 生物的代谢产物分为初级代谢产物和次级代谢产物。初级代谢产物是生物代谢活动产生的自身生长和繁殖必需的物质；次级代谢产物是生物生长到一定阶段才产生的、对该生物没有明显生理功能，或并非该生物生长和繁殖所必需的物质。结合（3）的信息，你认为紫杉醇是该植物的_____（初级/次级）代谢产物。
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【题目】2020年三月下旬，肆虐武汉的新冠病毒终于慢慢的停止了前进的脚步，与此同时相关的病毒基因的研究和疫苗临床试验正在紧张进行中，请分析下列各题：
（1）为了防止疫情的蔓延武汉1月23日封城，为疫情的防控做出了巨大的牺牲，从预防传染病的措施来看，这样做的主要目的是________________。
（2）中国科学院武汉病毒研究所右正丽团队在《自然》命名了新型冠状病毒为2019-nCov，还确认了它进入细胞的路径与SARS冠状病毒一样，即通过细胞膜上ACE2受体，由此角度你可以建议研制_____________________的药物来抑制病毒对细胞的感染。
（3）临床解剖表明，死者的肺部细胞内和组织液中均含大量的病毒，故机体的免疫系统要进行的特异性免疫类型有_____________________；研究人员还发现该病毒在全基因组水平上与SARS冠状病毒有79．5%的相似性，与一种蝙蝠冠状病毒相似度高达96%，表明蝙蝠可能是该冠状病毒的来源。“全基因组水平”的相似性从分子的角度指的是__________________________。
（4）中国陈薇院士团队研究的“重组疫苗”已经进入临床试验，同时在治疗过程发现使用治愈者的血清注射可以明显降低患者肺部细胞阴影面积和病毒含量，从免疫学角度来看二者的区别是_________________________________________________________________。
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【题目】病毒COVID-19又称新型冠状病毒。该病毒感染人体后，对以肺为主的多器官造成损伤，患新型冠状病毒肺炎。
（1）肺功能严重损伤的重症、危重症患者必须借助呼吸机才能维持生命，否则将严重危及生命，这是因为________。
（2）新冠病毒感染人体后，其增殖（繁殖）的场所是________（选择其中之一填写内环境/血浆/淋巴/组织液/细胞内）。
（3）目前，对于新型冠状病毒没有特效药，被感染者清除体内的新型冠状病毒依赖自身的免疫系统。新型冠状病毒侵入人体后，作为________，一方面，刺激细胞免疫产生的________，攻击、裂解靶细胞，释放新型冠状病毒。另-方面，刺激体液免疫产生的________中和新型冠状病毒，最后被吞噬细胞吞噬清除。
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