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    【题目】利用基因工程技术将人的胰岛素基因导入大肠杆菌制造“工程菌”的操作过程示意图，请据图完成下列问题。

    （1）“工程菌”是指用基因工程的方法，__________________________。过程⑦所需的酶根据来源不同分为_______________________两类。

    （2）在基因工程中，大肠杆菌常作为受体细胞其原因是______________（至少答两点）。目的基因能否在真核生物中稳定遗传的关键是采用____________________检测是否插入大肠杆菌的基因中。

    （3）经过目的基因的检测和表达，获得的胰岛素却往往无生物活性，导致这原因可能是______________________________________。

    （4）目前，科学家已经在牛和羊等动物乳腺生物反应器中表达出多种重要医药产品，是将药用蛋白基因与___________________等调控组件重组在一起，通过__________的方法，导入到羊或牛的__________中，使其生长发育为转基因动物，转基因动物进入泌乳期后，通过分泌的乳汁来生产所需要的药物。

    【答案】使外源基因得到高效率表达的菌类细胞株系 E·coli DNA连接酶和T4DNA连接酶 繁殖快、容易培养、多为单细胞、遗传物质相对较少 DNA分子杂交技术 大肠杆菌不含有内质网和高尔基体，不能对蛋白质进行加工、修饰 乳腺蛋白基因的启动子 显微注射法 受精卵

    【解析】

    分析题图：图示是利用基因工程技术生产胰岛素的操作过程示意图。图中①表示从胰岛B细胞中获取胰岛素mRNA的过程；②为逆转录过程，A为胰岛素基因；③④⑤表示目的基因的扩增过程；⑥表示用限制酶切割运载体形成黏性末端的过程；⑦表示基因表达载体的构建过程；⑧表示将目的基因导入受体细胞的过程；⑨表示目的基因随着受体细胞的增殖和扩增；⑩是从培养液中获取胰岛素的过程。

    （1）用基因工程的方法，使外源基因得到高效率表达的菌类细胞株系一般称为“工程菌”。过程⑦是将目的基因和运载体连接形成基因表达载体的过程，该过程需要DNA连接酶的催化，根据来源不同可将DNA连接酶分为E·coli DNA连接酶和T4DNA连接酶两类。

    （2）由于大肠杆菌繁殖快、容易培养、多为单细胞、遗传物质相对较少，所以常将大肠杆菌作为受体细胞。常用DNA分子杂交的方法检测目的基因有没有插入到大肠杆菌的基因中。

    （3）若成为有活性的胰岛素，还需要经过内质网和高尔基体等细胞器的加工，而大肠杆菌不含有内质网和高尔基体，不能对核糖体合成的蛋白质进行加工、修饰，所以大肠杆菌中获得的胰岛素往往无生物活性。

    （4）若想药用蛋白基因在乳腺细胞中表达，需要将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，通过显微注射的方法，导入到羊或牛的受精卵中，再通过早期胚胎培养和胚胎移植技术使其生长发育为转基因动物，转基因动物进入泌乳期后，通过分泌的乳汁来生产所需要的药物。

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