[题目]回答下列I.II两小题.I．抗虫的转基因植物.含有Bt蛋白.也叫毒蛋白.Bt蛋白本身其实没有任何毒性.但是鳞翅目幼虫的肠道壁上有一种特别的蛋白.喜欢与Bt蛋白结合.引起肠道壁穿孔.导致幼虫死亡.注: Cef. Carb 抑菌类抗生素(1)抗虫植物的抗虫效果与Bt蛋白的表达量直接相关.用作为抗原.通过制备作为特异探针.对Bt蛋� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

【题目】回答下列I、II两小题。

I．抗虫的转基因植物，含有Bt蛋白，也叫毒蛋白，Bt蛋白本身其实没有任何毒性，但是鳞翅目幼虫的肠道壁上有一种特别的蛋白，喜欢与Bt蛋白结合，引起肠道壁穿孔，导致幼虫死亡。

注： Cef， Carb 抑菌类抗生素

（1）抗虫植物的抗虫效果与Bt蛋白的表达量直接相关，用________________ 作为抗原，通过制备________________ 作为特异探针，对Bt蛋白表达进行检测。将Bt蛋白基因导入植物细胞的方法有________________ 和________________ 等。

（2）在农杆菌转化过程中，防止农杆菌过度生长是转基因成败的重要环节。因此植物材料和农杆菌共同培养结束后，转化组织需要________________ 处理，据图分析，选择抗生素的________________ 很关键。光电比色法可用于细菌细胞密度的吸光值的测定，OD600指的是某种溶液在600nm波长处的吸光值。吸光值与溶液中吸光物质的浓度呈正比，通常用于细菌细胞密度（OD600）测量；在测量过程中要保持溶液中的细菌处于____状态。如图可知，________________ （填Cef或Carb）在低浓度条件下对农杆菌有更好的抑制效果。

II．回答与泡菜制作有关的问题：

（1）泡菜发酵过程中的主要菌种是________________，在________________ 条件下，微生物将蔬菜中的糖和其他营养物质发酵成有机酸、________________ 和________________ 等。

（2）在泡菜制作过程中________________ ，________________ 两部操作主要是为了减少杂菌，还可以采用________________ ，________________ 两种方法缩短腌制时间。

【答案】Bt蛋白单克隆抗体农秆菌转化法基因枪法脱菌种类和浓度悬浮 Carb 假丝酵母和乳酸菌无氧醇类物质亚硝酸（HNO2）热水洗坛壁两次加白酒入坛前用开水浸泡一下蔬菜加入腌制过的泡菜汁

【解析】

1.光电比色法是通过测量菌悬液的光密度（OD600）值来估算细菌数，吸光值与溶液中吸光物质的浓度呈正比。据图可知，浓度为300mg/L时两种抗生素都可以完全抑制农杆菌的生长，所以头孢霉素（Cef）和羧苄青霉素（Carb）对农杆菌都有很好的抑制效果。

2.基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的获取，②基因表达载体的构建，③将目的基因导入受体细胞，④目的基因的检测与鉴定。

3. 制作泡菜的实验原理：
（1）乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。
（2）利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。
温度过高，食盐用量不足10%、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。一般在腌制10天后，亚硝酸盐的含量开始下降。
（3）测定亚硝酸盐含量的原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，与已知浓度的标准显色液目测比较，估算泡菜中亚硝酸盐含量。

I．（1）抗虫植物的抗虫效果与Bt蛋白的表达量直接相关，可用Bt蛋白作为抗原，通过制备单克隆抗体作为特异探针，利用抗原-抗体杂交方法对Bt蛋白表达量进行检测。将Bt蛋白基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法和基因枪法等。

（2）在农杆菌转化过程中，防止农杆菌过度生长是转基因成败的重要环节。因此植物材料和农杆菌共同培养结束后，转化组织需要脱菌处理，选择合适的抗生素和使用的抗生素浓度是实验成败的关键。光比色法可用于细菌细胞密度的测定，在测量过程中要保持溶液中的细菌处于悬浮状态。分析图示可知，Cef（头孢霉素）和Carb（羧苄霉素）两种抗生素对农杆菌有很好的抑制效果；当Carb浓度为50mg/L时，OD600几乎降为0，即细菌细胞数目为0，说明抗生素Carb浓度为50mg/L时可以完全抑制农杆菌的生长，Carb在低浓度条件下对农杆菌有更好的抑制效果。

II．（1）泡菜发酵过程中的主要菌种是假丝酵母和乳酸菌；在无氧条件下，微生物将蔬菜中的糖和其他营养物质发酵成有机酸、醇类物质和亚硝酸（HNO2）等。

（2）在泡菜制作过程中热水洗坛壁两次（去除杂菌）、加白酒（抑制杂菌生长）两部操作主要是为了减少杂菌污染；还可以采用入坛前用开水浸泡一下蔬菜（杀死植物细胞）、加入腌制过的泡菜汁（可以提供菌种）两种方法缩短腌制时间。

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A.左图细胞中标出的A基因和a基因所在的染色体位置发生过交叉互换

B.左图所示生物可能为雌性，图中②④染色体上的基因遗传上总是和性别相关联

C.图c时期可形成28对四分体，左图所示时期对应图中的d区段

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实验思路：______________________________。

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