Question

【题目】阅读如下材料，请回答下列问题：

材料甲：人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示。

(1)图中的高血压相关基因通常可以从基因文库中获取，含有一种生物所有基因的文库称为________，获得人体血清白蛋白基因后可以利用__________技术进行扩增，该技术要用到一种特殊的_________酶。该技术的基本反应过程：目的基因DNA受热_________后解链为单链，引物与单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶的作用下进行延伸，如此重复循环多次。该技术的原理是__________________。

(2)子代大鼠如果_________和出现高血压，即可分别在分子水平和个体水平上说明高血压相关基因已成功表达，然后可用其建立高血压转基因动物模型。

(3)基因工程的核心是________________________。

材料乙：为获得抗病毒的马铃薯植株，往往采用转基因技术，将病毒复制酶基因转移到马铃薯体内。其过程大致如下图所示。

(4)上述过程中，将目的基因导入马铃薯细胞使用了农杆菌转化法。该方法先将目的基因插入到农杆菌Ti质粒的__________上，然后通过农杆菌的转化作用，使目的基因进入植物细胞并插入到植物细胞的染色体DNA上。导入农杆菌时，要用_________处理土壤农杆菌，使之转变为感受态，然后将它们在缓冲液中混合培养以完成转化过程。目的基因在马铃薯体内能否成功转录，可采用的检测方法是_________。该转基因马铃薯产生的配子中___________(填“一定”或“不一定”）含有目的基因。

Answer 1

【答案】 基因组文库 PCR(或多聚酶链式反应） 热稳定DNA聚合酶（Taq酶） 变性 DMA双链复制 检测到体内有相关蛋白 构建基因表达载体 T—DNA Ca2+ 分子杂交技术 不一定

【解析】试题分析：材料一可知，图示是利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程图，首先将目的基因与表达载体连接形成重组质粒，再导入受精卵，进行早期胚胎培养和胚胎移植，最终获得转基因大鼠。材料二可知，目的基因插人Ti质粒的T-DNA上→转入农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。

（1）获取目的基因（人的血清白蛋白基因）的方法：从基因文库（或自然界已有的物种中分离）获取；获得人体血清白蛋白基因后可以利用PCR技术进行扩增，该技术要用到一种特殊的热稳定高的DNA聚合酶，PCR扩增DNA的过程包括高温变性、低温复性、中温延伸过程，因此，利用PCR技术扩增目的基因的过程中，目的基因受热变性，DNA双链形成单链并与引物结合，在Taq聚合酶的作用下延伸形成DNA，因此该技术的原理是DNA复制。

（2）子代大鼠如果检测出与高血压有关的蛋白质和表现高血压症状，说明高血压基因已经成功表达。

(3)基因工程的核心是构建基因表达载体。

（4）该方法先将目的基因插入到农杆菌Ti质粒的T-DNA上，然后通过农杆菌的转化作用，将外源基因导入植物体内，农杆菌转化法常用到的工具酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶；将目的基因导入微生物细胞时，常用感受态细胞法，即用Ca2+处理微生物（土壤农杆菌），使之转变为容易吸收周围环境中DNA分子的感受态，进而使外源基因容易导入．由于减数分裂形成配子时，同源染色体分离，配子中的染色体数目减半，所以配子不一定会存在导入的目的基因。