Question

α₁-抗胰蛋白缺乏症是一种在北美较为常见的单基因遗传病，患者成年后会出现肺气肿及其他疾病，严重者甚至死亡。对于该致病患者常可采用注射人α₁-抗胰蛋白酶来缓解症状。

（1）图1表示获取人α₁-抗胰蛋白酶基因的两种方法，请回答下列问题： 

①a过程是在           酶的作用下完成的，该酶的作用特点是           。

②c过程称为           ，该过程需要的原料是                      。

③要确定获得的基因是否是所需的目的基因，可以从分子水平上利用

                  技术检测该基因的碱基序列。

（2）利用转基因技术将控制该酶合成的基因导入羊的受精卵，最终培育出能在乳腺细胞表达人α1-抗胰蛋白酶的转基因羊，从而更易获得这种酶，简要过程如图2。

①获得目的基因后，常利用           技术在体外将其大量扩增。

②载体上绿色荧光蛋白（GEP）基因的作用是便于           。基因表达载体d，除图中的标示部分外，还必须含有           。

③若要使转基因羊的后代均保持其特有的性状，理论上应选用           技术进

行繁殖。

 

Answer 1

【答案】

 (1)①限制性核酸内切酶    识别特定的核苷酸序列（1分），并在特定的切点上切割DNA分子（1分）

 ②逆(或反)转录    4种脱氧核苷酸

③DNA分子杂交（2分）

(2)①PCR（2分）

 ②筛选含有目的基因的受体细胞（2分）    启动子、终止子（2分）

 ③体细胞克隆（2分）

【解析】

试题分析：（1）目的基因的获取包括直接分离法和人工合成法，人工合成法又包括反转录法和化学合成法。方法1采用直接分离法获得目的基因，需要用限制性核酸内切酶将目的基因剪切下来，该酶的作用是能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。方法2采用反转录法获取目的基因，b过程为DNA的转录，从细胞中获得mRNA，在体外通过逆转录以4种游离的脱氧核苷酸为原料来合成目的基因。要检测获得的基因是否是所需要的基因，分子水平上利用DNA分子杂交技术。（2）PCR技术可以在短时间内大量扩增目的基因。标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。基因表达载体必须含有启动子、终止子、目的基因和标记基因。要使后代保持与亲本相同的性状，理论上应选用动物体细胞核移植技术进行繁殖。

考点：该题主要考查基因工程的相关知识。意在考生的识记及应用能力。