Question

(2006山东潍坊统考) 凝胶色谱技术是20世纪60年代初发展起来的一种快速而又简单的分离技术，由于设备简单、操作方便、不需要有机溶剂、对高分子物质有很高的分离效果，目前已经被生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学以及医学等有关领域广泛采用，不但应用于科学实验研究，而且已经大规模地用于工业生产。

参照右上图，完成问题：

(1)a、b均为蛋白质分子，其中先从层析柱中洗脱出来的是________，原因是　　　　　　　　　。

(2)自己制作凝胶色谱柱时，在色谱柱底部d位置相当于多孔板的结构可由______替代。

(3)装填凝胶色谱柱时，色谱柱内不能有气泡存在，原因是________________________。

(4)若选用SephadexG100，则“G”表示　　　　　　　，100表示__________________。

(5)洗脱用的液体应尽量与浸泡凝胶所用的液体______（相同/不同），洗脱时，对洗脱液的流速要求是______。

 

Answer 1

（1）a　a相对分子质量大，无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快（2）尼龙网和尼龙纱　（3）气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果　（4）凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围　凝胶得水值，即每克凝胶膨胀时吸水10 g　（5）相同　保持稳定

 

考查凝胶色谱法分离蛋白质的原理、色谱柱的制作材料、装填色谱柱的注意事项、洗脱液的使用等知识。