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    17．中新社2010年10月25日报道，中科院昆明动物研究所季维智研究员领导的研究小组，日前成功培育出中国首例转基因猕猴．这一研究成果标志着中国科学家在非人灵长类转基因动物研究方面达到世界领先水平，为未来人类重大疾病的非人灵长类动物模型的深入研究奠定了坚实的基础．如图是转基因猕猴培育过程示意图，请据图回答问题．

    （1）过程②中常用显微注射的方法将目的基因导入受精卵．
    （2）在体外培养受精卵时，除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外，还需要提供CO2气体以维持培养液的pH．
    （3）图中过程⑦称为胚胎移植，为使代孕雌猴与供体雌猴生殖器官的生理变化相同，此前需对代孕雌猴作同期发情处理．
    （4）若要同时获得多只与此转基因猕猴相同的小猴，可对早期胚胎进行胚胎分割，操作时选择发育到桑椹胚或囊胚期的胚胎．若选用囊胚期的胚胎，操作过程中需要特别注意的问题是对囊胚的内细胞团进行均等分割，否则会影响胚胎的恢复和进一步发育．

    分析 分析题图：图示是转基因猕猴培育过程示意图，其中①表示基因表达载体的构建，②将目的基因导入受精卵，③表示卵母细胞的采集，④表示精子的采集和获能，⑤表示体外受精，⑥表示早期胚胎培养，⑦表示胚胎移植，⑧表示妊娠．

    解答 解：（1）将目的基因导入动物细胞常用显微注射法．
    （2）动物细胞培养时，提供CO2气体的作用是维持培养液的pH．
    （3）图中⑦为胚胎移植过程；为使代孕雌猴与供体雌猴生殖器官的生理变化相同，此前需对代孕雌猴作同期发情处理．
    （4）来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此要同时获得多只与此转基因猕猴相同的小猴，可对早期胚胎进行胚胎分割；对囊胚期的胚胎进行分割时，要对囊胚的内细胞团进行均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育．
    故答案为：
    （1）显微注射　
    （2）培养液的pH　
    （3）胚胎移植　同期发情　
    （4）胚胎分割　对囊胚的内细胞团进行均等分割  胚胎的恢复和进一步发育

    点评 本题结合转基因猕猴培育过程示意图，考查基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤；识记动物细胞培养的具体过程及条件；识记体外受精技术和胚胎移植的基本程序，能结合所学的知识准确答题．

    练习册系列答案
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    （1）实验一：利用不同浓度的BL和IAA处理油菜萌发的种子，观察其对主根伸长的影响，结果如上甲图所示．单独IAA处理，对主根伸长的影响是低浓度促进伸长，高浓度抑制伸长；BL与IAA同时处理，在IAA浓度范围为0-10nM时，BL对主根伸长的抑制作用逐渐增强；当IAA浓度继续增加时，BL对主根伸长的影响是促进．
    （2）实验二：用放射性碳标记的IAA处理主根，检测油菜素内酯对于生长素运输的影响，实验方法及结果如上图乙所示．标记的生长素在根部的运输方向为双向，BL可以促进（促进/抑制）生长素运输，且对极性运输（运输方向）的作用更显著．
    （3）实验三：PIN蛋白与生长素的运输有关．测定了BL处理的根部组织中PIN蛋白基因的表达水平，结果如表所示．
    测定方法：从植物特定组织中提取RNA，利用RNA为模板经逆转录得到cDNA；以该cDNA为模板进行PCR，向反应体系中加入dNTP、Taq酶及不同的引物得到不同的DNA片段．根据扩增出的不同DNA片段的量不同，反映相关基因在特定组织中的转录水平，用以代表相应基因的表达水平．
    测定指标组别PIN蛋白基因表达水平（相对值）
    对照组7.3
    一定浓度BL处理组16.7
    （4）上述系列实验结果表明，油菜素内酯通过影响根细胞中PIN蛋白基因的表达，进而影响生长素的运输．

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