图甲.乙中的箭头表示三种限制性核酸内切酶的酶切位点.ampr表示氨苄青霉素抗性基因.neo表示新霉素抗性基因.下列叙述正确的是A．图甲中的质粒用BamHⅠ切割后.含有4个游离的磷酸基团B．在构建重组质粒时.可用PstⅠ和BamHⅠ切割质粒和外源DNAC．用PstⅠ和HindⅢ酶切.加入DNA连接酶后可得到1种符合要求的重组质粒D．导入目的基因的大肠杆菌可在含� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

图甲、乙中的箭头表示三种限制性核酸内切酶的酶切位点，ampr表示氨苄青霉素抗性基因，neo表示新霉素抗性基因。下列叙述正确的是(??? )

A．图甲中的质粒用BamHⅠ切割后，含有4个游离的磷酸基团

B．在构建重组质粒时，可用PstⅠ和BamHⅠ切割质粒和外源DNA

C．用PstⅠ和HindⅢ酶切，加入DNA连接酶后可得到1种符合要求的重组质粒

D．导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长

【答案】

【解析】图甲中的质粒用BamHⅠ切割后，会破坏两个磷酸二酯键，磷酸二酯键是由相邻脱氧核苷酸的磷酸基团和脱氧核糖脱水形成的，因此只含有2个游离的磷酸基团。由于BamHⅠ的切割位点在目的基因的内部，使用它切割外源DNA会破坏目的基因。用PstⅠ和HindⅢ切割质粒后，虽然破坏了ampr基因，但是会保留下neo基因作为标记基因，以备筛选。用PstⅠ和HindⅢ切割外源DNA后，可得到两个能与质粒连接的DNA片段，但是只有带目的基因的DNA片段与酶切后的质粒连接才符合要求。由于氨苄青霉素抗性基因遭到破坏，因此，只能用含新霉素的培养基进行筛选。

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