Question

尿素是一种高浓度氮肥且长期施用没有不良影响，但尿素只有通过土壤中某些细菌分解为氨后，才能被植物吸收利用．分解尿素的细菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解．某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下：

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4?7H2O	蛋白胨	葡萄糖	尿素	琼脂
1.4 g	2.1g	0.2g	1.0g	10.0g	1.0g	15.0g

（1）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？

 

（能/不能），原因是

 

．
（2）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用

 

法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的

 

就能大约推测出样品中活菌数．
（3）接种前要对培养基进行

 

处理．在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在

 

条件下进行．
（4）一同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是

 

，应当怎样操作才可避免此种现象？

 

．
（5）如果探究温度对纤维素酶活性的影响，自变量是

 

，应该保持

 

（至少答两项）等不变．

Answer 1

考点：以尿素为氮源，测定能生长的细菌的数量

专题：

分析：尿素分解菌体内的脲酶能够将土壤中的尿素分解为氨才能被植物吸收利用，尿素分解菌属于细菌，筛选尿素分解菌需要使用以尿素为唯一碳源的选择培养基．微生物筛选与培养的关键是无菌操作，常用的接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法．

解答： 解：（1）据题表分析，表中的配方不能筛选分离出尿素分解菌，原因是没有使用选择培养基，即培养基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能选择出只分解以尿素为氮源的微生物．
（2）稀释涂布平板法接种常用来进行微生物的计数，统计平板上的菌落数目可以推测出样品中活菌数．
（3）培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌，微生物筛选与分离成功的关键是无菌操作．
（4）培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是菌液没有梯度稀释，浓度过高．要避免此种现象需要对菌液进行梯度稀释．
（5）探究温度对纤维素酶活性的影响实验中，温度是自变量，纤维素的量与浓度、反应时间、pH属于无关变量，应当保持不变．
故答案为：
（1）不能，培养基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能选择出只分解以尿素为氮源的微生物
（2）稀释涂布平板，菌落数目  
（3）灭菌    无菌
（4）菌液浓度过高     对菌液进行梯度稀释
（5）温度    纤维素的量与浓度、反应时间、pH

点评：本题主要考查目的微生物的筛选与分离，意在强化学生对微生物筛选过程与分离的理解与运用．