Question

氯苯化合物是重要的有机化工原料，因其不易降解，会污染环境。某研究小组依照下列实验方案(图1)筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培养基配方如表1。

图1

表1　培养基的组成

 

液体培养基	蛋白胨	牛肉膏	氯苯	氯化钠	硝酸铵	无机盐(无碳)	蒸馏水
Ⅰ号	10 g	5 g	5 mg	5 g	—	—	1L
Ⅱ号	—	—	50 mg	5 g	3 g	适量	1L
Ⅲ号	—	—	20～80 mg	5 g	3 g	适量	1L

(1)配制Ⅱ号固体培养基时，除添加Ⅱ号液体培养基成分外，还应添加1%的________。

(2)培养基配制时，灭菌与调pH的先后顺序是____________

________________________________________________________________________。

(3)从用途上来说，Ⅰ号培养基和Ⅱ号培养基分别属于______培养基和________培养基。在Ⅱ号培养基中，为SP1菌提供氮源的成分是________。

(4)在营养缺乏或环境恶劣时，SP1的菌体会变成一个圆形的休眠体，这种休眠体，被称为________。

(5)将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的Ⅲ号培养液中培养，得到生长曲线(如图2)。从图2可知，SP1菌在________培养条件下最早停止生长，其原因是_________________。

图2

 

Answer 1

　(1)琼脂　(2)先调pH，后灭菌　(3)通用　选择

硝酸铵　(4)芽孢　(5)20 mg/L氯苯　碳源最早耗尽

 

配制固体培养基时应在液体培养基的成分中再加入琼脂作为凝固剂。在配制培养基时应先调节pH，后进行灭菌，防止灭菌后在调节pH的过程中污染培养基。据表可知，培养基Ⅰ为牛肉膏蛋白胨培养基，包括碳源、氮源、水、无机盐和生长因子，适用于多种微生物的培养。培养基Ⅱ不加牛肉膏和蛋白胨，以硝酸铵为氮源，可以选择出以硝酸铵为氮源的微生物，是选择培养基。在营养缺乏、环境恶劣时，微生物可以形成休眠体—芽孢，来度过不良环境。据图2可知，SP1菌在20 mg/L氯苯培养条件下菌体数最早达到最大值，即最早停止生长，原因是在培养基Ⅲ中，氯苯是唯一碳源，由于20 mg/L氯苯培养条件氮源最少，因此也最早被耗尽，使SP1菌停止生长。