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    5．某学习小组进行“培养液中酵母菌种群数量与时间的变化关系”的探究实验．
    实验材料、用具：菌种和无菌培养液、试管、血球计数板 （计数室为1mm×1mm方格，由400个小格组成）、滴管、无菌水、台盼蓝染液（对活细胞无染色效果）、显微镜等．
    （1）本实验中，某学生的部分实验操作过程是这样的：①把酵母菌培养液放置在适宜的环境中培养，第7天开始取样计数；②取样前振荡试管使得酵母菌分布均匀．用无菌吸管从试管中吸取酵母菌培养液少许；③培养液加入血细胞计数板计数室，再盖上盖玻片，并用滤纸吸去多余菌液．请纠正该同学实验操作中的两个错误．（指出第几步，并说出错误）
    ①第1步，第一天开始取样计数，连续7天，进行前后对照；②第3步，先盖上盖玻片，再加入血球计数板计数室；
    （2）本实验没有另设对照实验，原因是该实验在时间上形成前后对照．该实验需要重复实验，原因是避免实验偶然性带来的误差．
    （3）在吸取培养液计数前，要轻轻震荡几次试管，原因是使酵母菌分布均匀．
    （4）某同学第5天在使用血球计数板计数时做法如下：
    ①振荡摇匀试管，取1mL培养液并适当稀释（稀释样液的无菌水中加入了几滴台盼蓝染液）．
    ②制作好临时装片．
    ③显微镜下观察计数：在观察计数时只计不被 （“被”或“不被”）染成蓝色的酵母菌．在用血球计数板对某一稀释10倍样品进行计数时，发现在一个小方格内（盖玻片下的培养液厚度为0.1mm）酵母菌平均数为5，据此估算10mL培养液中有酵母菌2×109．

    分析 本题研究培养液中酵母菌种群数量与时间的关系，其自变量为时间，因变量为酵母菌种群数量．
    酵母菌可以用液体培养基来培养，培养液中的酵母菌种群的增长情况与培养液中的成分、空间、pH、温度等因素有关，可以根据培养液中的酵母菌数量和时间为坐标轴做曲线，从而掌握酵母菌种群数量的变化情况．
    利用血球计数板在显微镜下直接计数是一种常用的细胞计数法，这种方法可以直接测定样品中全部的细胞数目，所以一般用于单细胞微生物数量的测定，由于血球计数板上的计数室盖上盖玻片后的容积是一定的，所以可根据在显微镜下观察到的细胞数目来计算单位体积的细胞的总数目．

    解答 解：（1）该同学实验操作中有两个错误：①第1步，第一天开始取样计数，连续7天，进行前后对照；②第3步，先盖上盖玻片，再加入血球计数板计数室．
    （2）该实验在时间上形成前后对照，没有另设对照实验．为了避免实验偶然性带来的误差，该实验需要重复实验．
    （3）在吸取培养液计数前，要轻轻震荡几次试管，使酵母菌分布均匀．
    （4）③显微镜下观察计数：被染成蓝色的酵母菌为死细胞，在观察计数时只计不被染成蓝色的酵母菌．在用血球计数板对某一稀释10倍样品进行计数时，发现在一个小方格内酵母菌平均数为5，据此估算10mL培养液中有酵母菌5×400÷10-4×10×10=2×109．
    故答案为：
    （1）①第1步，第一天开始取样计数，连续7天，进行前后对照．
    ②第3步，先盖上盖玻片，再加入血球计数板计数室．
    （2）该实验在时间上形成前后对照  　　 避免实验偶然性带来的误差（或其他合理答案）
    （3）使酵母菌分布均匀
    （4）不被      2×109

    点评 本题考查了探究培养液中酵母菌种群数量的变化的实验方面的相关知识，要求考生掌握调查的方式和实验过程中的相关注意点；学会酵母菌计数的方法，并能利用公式对数量进行计算，难度适中．

    练习册系列答案
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