Question

【题目】如图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线．图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHI、HindIII、Sma I直线所示为三种限制酶的酶切位点．据图回答：

（1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用 限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因．筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含 的培养基上进行．能驱动人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控因子是图中的 ．过程①采用的操作方法通常是 ．
（2）过程②代表的生物技术是 ．对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体．目前最常见的是经分割产生的同卵 胎．
（3）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用 技术．
（4）对代孕牛的要求是

Answer 1

【答案】HindⅢ和BamHⅠ；氨苄青霉素；启动子；显微注射；胚胎移植；双；抗原﹣抗体杂交；有健康体质和正常繁殖能力
【解析】解：（1）外源DNA分子上含有限制酶BamHI、HindIII、SmaI的切割位点，其中限制酶SmaI的切割位点位于目的基因上，所以获取目的 基因和构建基因表达载体时，应用限制酶HindⅢ和BamHⅠ．用限制酶HindⅢ和BamHⅠ切割质粒后，会破坏质粒上的四环素抗性基因，但不会破坏氨苄青霉素抗性基因，因此筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含氨苄青霉素的培养基上进行．启动子是能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序 列．过程①是将重组质粒导入受体细胞，当受体细胞是动物细胞时，将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法．
（2）过程②需要采用胚胎移植技术；目前最常见的是经胚胎分割产生的同卵双胎．
（3）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用抗原﹣抗体杂交技术．
（4）对代孕牛的要求是有健康体质和正常繁殖能力．
【考点精析】通过灵活运用基因工程的原理及技术，掌握基因工程的原理是利用DNA重组技术即可以解答此题．