Question

6．如图是体外受精技术培育试管动物的大致流程，请回答下列问题：

（1）精子的顶体内含有顶体酶能协助精子穿过卵母细胞的放射冠和透明带．
（2）体外培养受精卵时，除给予一定量的O₂以维持细胞呼吸外，还提供CO₂气体以维持培养液的pH相对稳定．
（3）动物的早期胚胎需移植到同种且生理状态与供体相同的动物体内，被移植的胚胎之所以能存活是因为受体对外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应．
（4）如果将某种目的基因导入动物细胞，以期获得新性状，最常用的方法是用显微注射技术将含有目的基因的表达载体（重组表达载体DNA分子）导入受精卵中，目的基因能够导入到受体细胞内，并且在受体细胞中稳定表达的过程称为转化．

Answer 1

分析 1、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
2、动物细胞的培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物．
（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．
（3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4．
（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO₂（维持培养液的PH）．
3、胚胎移植的生理学基础：
①动物发情排卵后，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的．这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境．
②早期胚胎在一定时间内处于游离状态．这就为胚胎的收集提供了可能．
③受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应．这为胚胎在受体的存活提供了可能．
④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响．

解答 解：（1）精子的顶体内含有顶体酶能协助精子穿过卵母细胞的放射冠和透明带．
（2）体外培养受精卵时，除给予一定量的O₂以维持细胞呼吸外，还提供CO₂气体以维持培养液的pH相对稳定．
（3）动物的早期胚胎需移植到同种且生理状态与供体相同的动物体内，被移植的胚胎之所以能存活是因为受体对外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应．
（4）如果将某种目的基因导入动物细胞，以期获得新性状，最常用的方法是用显微注射技术将含有目的基因的表达载体（重组表达载体DNA分子）导入受精卵中，目的基因能够导入到受体细胞内，并且在受体细胞中稳定表达的过程称为转化．
故答案为：
（1）顶体酶　放射冠和透明带
（2）CO₂　培养液的pH   
（3）生理状态　外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应
（4）含有目的基因的表达载体（重组表达载体DNA分子）  转化

点评 本题考查基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤；识记动物细胞培养的条件；识记体外受精的具体过程及胚胎移植的基本程序，能结合所学的知识准确答题．