Question

香蕉果实中的淀粉酶可分为α-淀粉酶和β-淀粉酶两种，其中β-淀粉酶不耐热，在温度70℃以上易钝化，而α-淀粉酶耐热。测定不同成熟度的香蕉中两种淀粉酶的活性，对研究香蕉的保鲜具有重要意义。请完成以下的实验方案。

实验目的：测定一定成熟度香蕉果实中α-淀粉酶和β-淀粉酶活性

实验原理：α-淀粉酶和β-淀粉酶都能将淀粉分解为麦芽糖，通过特定方法测定麦芽糖的含量。以5分钟内每克样品水解产生麦芽糖的毫克数表示酶活性的大小。

实验方法

⑴．酶液的制备：称取香蕉果肉2克（含外壳），加适量水置研钵中研磨成匀浆。将匀浆转入离心管中，搅拌均匀后离心，将上清液转入100mL容量瓶，用水定容至刻度，得粗酶液。

⑵．首先将粗酶液分装到两支试管，甲试管酶液进行70℃±0.5℃恒温水浴中准确加热处理15分钟后，乙试管酶液置于40℃水浴中。

⑶．取试管三个，编号，按下表加入各液：（在答案卷填写1、2号实验组所缺的内容）

试剂 组别	1%可溶性淀粉液	酶液
对照组	0 mL	1 mL乙试管酶液
1号实验组（测α-淀粉酶活性）	2 mL	？
2号实验组 （测总淀粉酶活性）	2 mL	？

将以上各管试剂混匀后，置40℃水浴准确保温5分钟，取出后立即向1、2、3号试管中加入4mL 0.4mol/L NaOH，以终止反应。

⑷．测定各试管麦牙糖含量，计算总淀粉酶活性酶活性、α-淀粉酶活性和β-淀粉酶活性（如α-淀粉酶活性=实验组1测定值—对照组测定值。其他具体方法略）回答问题：

a作为对照组，另一种做法是加入淀粉液但不加酶液，两者相比较，现行做法的优点是______________________________________。

b实验所测得β-淀粉酶活性=___________________________________。

Answer 1

⑶1 mL甲试管酶液（实验组1）  1 mL乙试管酶液（实验组2）

⑷a 香蕉酶提取液中可能含有还原糖，对实验结果会造成影响，现行对照实验能消除由此产生的误差。

B．２号实验组测定值—1号实验组测定值（或=总淀粉酶活性—α-淀粉酶活性）

解析:

该题要测定一定成熟度香蕉果实中α-淀粉酶和β-淀粉酶活性，因此应遵循对照原则、科学性原则和单一变量原则。由题干得知β-淀粉酶不耐热，在温度70℃以上易钝化，而α-淀粉酶耐热。而实验原理题干中已经有所描述，在具体步骤的设计中要注意：①编号；②注意等量原则；③甲试管酶液进行70℃±0.5℃恒温水浴处理后β-淀粉酶失活，用甲试管酶液分解淀粉所产生的麦芽糖的毫克数可衡量α-淀粉酶活性，乙试管酶液置于40℃水浴中后α-淀粉酶和β-淀粉酶的活性均未被破坏，用乙试管酶液分解淀粉所产生的麦芽糖的毫克数可衡量总淀粉酶的活性，故参照对照组，1号和2号的实验组应分别加入1 mL甲试管酶液和1 mL乙试管酶液；a作为对照组，另一种做法是加入淀粉液但不加酶液，两者相比较，加入酶液可排除香蕉酶提取液中可能含有的还原糖这个无关变量对实验结果的干扰，避免误差；预测得β-淀粉酶活性，因α-淀粉酶比β-淀粉酶耐热，很难从粗酶液直接处理掉α-淀粉酶，故只能以２号实验组的测定值—1号实验组的测定值来衡量。