Question

【题目】有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。科研人员通过人工筛选获得高效的苯磺隆降解菌，将其扩大培养后投入污染土壤中，可将土壤中的苯磺隆降解。请回答下列问题：

（1）欲选择性获得能降解苯磺隆的降解菌，可在被有机农药苯磺隆污染的土壤中取样，并在含有碳源、氮源及_________等的选择培养基上添加_________进行选择培养。在降解菌数量足够多时，适当提高样品中苯磺隆的浓度能使苯磺隆降解效率增加，其原因是___________（从酶与底物的相互关系角度分析）。

（2）若要测定培养液中选定菌种的菌体数，可在显微镜下用________直接计数，也可选用________方法统计活菌数目。

（3）将筛选的苯磺隆降解菌固定在一定的空间内定殖于土壤中能提高降解效率，固定苯横隆降解菌的一般方法为包埋法，不使用化学结合法和物理吸附法的原因是__________。

（4）研究人员从苯磺隆降解菌中分离出苯磺隆降解酶，分离该降解酶的常用方法有凝胶色谱法和__________。凝胶色谱法分离蛋白质的原理是根据____________进行分离。

Answer 1

【答案】水和无机盐 苯磺隆 酶量充足时，酶促反应速度随底物浓度增加而加快 血细胞计数板 稀释涂布平板 体积大的细胞难以被吸附或结合 电泳法 相对分子质量大小

【解析】

培养基一般含有水、碳源、氮源、无机盐等。

常用的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。

固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。

凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。

（1）培养基的主要成分为水、碳源、氮源和无机盐；为了获得能降解有机农药苯磺隆的微生物菌种，可用含有有机农药苯磺隆的选择培养基进行选择培养，只有能分解苯磺隆的微生物才能存活。苯磺隆是待降解的底物，酶量充足时，底物浓度适当升高，酶促反应速率随底物浓度增加而加快。

（2）若要测定培养液中选定菌种的菌体数，既可在显微镜下用血细胞计数板直接计数（不能区分死菌和活菌），也可选用稀释涂布平板法统计活菌数目。

（3）固定化酶和固定化细胞所用的方法有化学结合法、物理吸附法、包埋法，固定化细胞一般用包埋法，原因是体积大的细胞难以被吸附或结合。

（4）实验室分离蛋白质的常用方法有电泳法和凝胶色谱法。凝胶色谱法分离蛋白质的原理是根据蛋白质的相对分子质量大小。