Question

[生物--选修3现代生物科技专题]
猪的基因和人类的基因存在一定的相似度．据报道经特殊处理的猪皮可在人身上存活3周左右，起保护创面免受感染的作用．移植猪皮后，还要在猪皮上开很多小口，在小口处植入患者的自体皮肤组织，自体皮肤慢慢生长，逐渐覆盖原先创面，而猪皮最终会掉光．为了使移植的猪皮存活更长时间，有人设法导入人的相关基因（用P表示），获得转基因小白猪．其简要流程如图所示：

据图中信息并结合课本知识回答：
（1）过程①中形成重组研蛆常用的酶有限制性核酸内切酶和

 

；将目的基因导入成纤维细胞常用的方法是

 

．
（2）过程②中，常用

 

酶处理，将皮肤组织块分散戍单个成纤维细胞．在培养成纤维细胞时需要满足的条件是无菌、无毒、通气、适宜的温度、pH以及

 

．
（3）图中的卵母细胞应在体外培养到

 

，并作除去细胞核的处理；过程③中所用的技术是

 

；能代替图中卵母细胞的还可以是

 

．
（4）图示技术除可用于器官移植外，还用于

 

．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,动物细胞与组织培养过程,动物细胞核移植技术

专题：

分析：根据图示，可知①是基因表载体的构建、②是动物细胞培养、③是早期胚胎培养．
通过核移植技术形成重组细胞，首先对供体用促性腺激素处理，使其超数排卵；另需要将卵母细胞培养到减数第二次分裂中期才可以去核．
动物细胞培养基含有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质，另外需要无菌和无毒的环境．

解答： 解：（1）在构建表达载体时，要用同一种限制酶切割质粒和目的基因，使质粒和目的基因产生相同的末端，再用DNA连接酶连接成重组质粒．受体细胞是动物细胞，可以通过显微注射法将目的基因转化入受体细胞．
（2）动物细胞培养时，取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织），用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞．动物细胞培养需要在无菌、无毒的环境、营养物质充沛、适宜的温度和PH、气体环境等条件．
（3）卵母细胞应在体外培养到减数第二次分裂中期（或MII中期），并作除去细胞核的处理；过程③中所用的技术是（早期）胚胎体外培养；能代替图中卵母细胞的还可以是去核的受精卵（或去核的卵细胞）．
（4）图示技术除可用于器官移植外，还用于培育并繁殖优良品种家畜；作为生物反应器生成医药蛋白等．
故答案为：
（1）DNA连接酶      显微注射法
（2）胰蛋白（或胶原蛋白）      营养
（3）减数第二次分裂中期（或MII中期）     （早期）胚胎体外培养     去核的受精卵（或去核的卵细胞）
（4）培育并繁殖优良品种家畜；作为生物反应器生成医药蛋白等

点评：本题综合考查了细胞工程、胚胎工程和基因工程的相关知识，考生要识记基因工程的操作工具；掌握目的基因检测和鉴定的方法；识记动物细胞培养的过程和培养条件等；明确卵母细胞在进行细胞核移植前的准备；识记胚胎工程和基因工程的相关应用．