Question

红细胞是脊椎动物体内通过血液运送氧气的最主要的媒介，含有大量的血红蛋白时，我们可以选用动物的血液来提取和分离血红蛋白，请回答下列有关问题：
（1）提取和分离血红蛋白时，首先对红细胞进行洗涤以去除杂质蛋白，洗涤时应使用生理盐水而不使用蒸馏水的原因是

 

．
（2）将洗涤好的红细胞倒入烧杯中，加入

 

充分搅拌，红细胞破裂，释放出血红蛋白．
（3）分离蛋白质分子的一种常用方法是凝胶色谱法（如图），是根据

 

分离蛋白质的有效方法．
①a、b均为蛋白质分子，其中先从层析柱中洗脱出来的是

 

，原因是

 

 

．
②装填凝胶色谱柱时，色谱柱内不能有气泡存在，原因是

 

．
（4）血红蛋白提取和分离的程序为

 

和纯度鉴定．

Answer 1

考点：酶活力测定的一般原理和方法

专题：

分析：熟悉记忆血红蛋白提取和鉴定实验的原理，操作步骤．注意事项．

解答： 解：（1）生理盐水保持红细胞渗透压的稳定而不破碎在未洗净血浆中杂质蛋白前，红细胞如果破裂了，就可能是血红蛋白和杂质蛋白混在一起，加大分离难度．  故答案为：防止红细胞吸水破裂（2）加蒸馏水是让细胞吸水膨胀破裂．细胞膜主要成分是磷脂，易溶于甲苯等有机溶剂，加入甲苯能加快红细胞破碎并释放出红细胞．  故答案为：蒸馏水和甲苯
（3）凝胶色谱法，根据相对分子量大小分离物质，分子量大的先分离出来，分子量小的之后分离出来．   故答案为：相对分子质量大小
①相对分子质量大的物质，无法进入凝胶珠中的通道孔，只能留在凝胶珠之间的空隙中．   故答案为：a   a相对分子质量大，无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移速较快②装填凝胶色谱柱时，色谱柱内不能有气泡存在，因为气泡会扰乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果．   故答案为气泡会扰乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果．（4）血红蛋白提取和分离的程序为：样品处理（红细胞洗涤、血红蛋白的释放）、粗分离（分离血红蛋白溶液、透析）、纯化和纯度鉴定．  故答案为：样品处理、粗分离、纯化

点评：本题考查了血红蛋白的提取和分离实验．意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力；