申请专利号 | 03109739.1 | 专利申请日 | 2003.04.14 |
名称 | 利用转基因番茄生产胰岛素的方法 | 公开号 | 1458161 |
公开日 | 2003.11.26 | 申请(专利权) | 林忠平 |
地址 | 北京市北京大学生命科学学院 | 搜索 发明(设计)人 | 林忠平、倪挺、陈溪、胡武雷 |
专利摘要 | 本发明利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素,所用的人胰岛素基因是依据植物偏爱密码子的原则来设计所含的密码子,通过人工合成若干DNA片段,拼接而成,并且在C端上加上KDEL的内质网滞序列,避免胰岛素在植物细胞中的降解.将该基因置于CaMV35S启动子和果实专一性启动子2A12的驱动之下通过农杆菌介导的方法转入番茄中,在番茄中表达人胰岛素. |
分析 1、试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育为早期胚胎后,再经移植后产生后代的技术.设计试管婴儿技术是通过体外受精获得许多胚胎,然后从中选择符合要求的胚胎,再经移植后产生后代的技术.
2、基因工程技术的基本步骤:
(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成.
(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等.(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法.
(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术.个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等.
解答 解:(1)“试管婴儿”的形成主要采用了体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等技术,属于有性生殖;若要得到“同卵双胞胎”,还需采用胚胎分割技术.
(2)“试管婴儿”技术诞生后,继而出现了“设计试管婴儿技术”,二者在技术上的区别是后者必需做植入前胚胎遗传学诊断,选择出符合要求的胚胎.
(3)此基因工程的目的是利用转基因番茄生产胰岛素,可见目的基因是人胰岛素基因.将人工合成的DNA片段拼接在一起,首先要用同种限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体,其次还需要用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA分子.
(4)该项技术所用的人胰岛素基因是通过人工合成的若干DNA片段拼接而成,并且在C端上加上KDEL的内置网滞序列,因此合成的胰岛素可在植物细胞的内质网中保存,以避免胰岛素在植物细胞中被降解.
(5)将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法,即用目的基因与农杆菌的质粒(或Ti质粒)结合构建表达载体.目的基因能否在番茄中稳定遗传的关键是番茄染色体DNA上是否插入了目的基因.
故答案为:
(1)体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植 胚胎分割
(2)植入前胚胎遗传学
(3)人胰岛素基因 限制酶、DNA连接酶
(4)内质网
(5)质粒(或Ti质粒) 番茄染色体DNA上是否插入了目的基因
点评 本题考查基因工程和胚胎工程的相关知识,要求考生识记基因工程的原理及操作步骤,掌握各操作步骤中需要注意的细节问题;识记试管婴儿技术,掌握试管婴儿和设计试管婴儿的区别,能结合所学的知识准确答题.
科目:高中生物 来源:2015-2016学年河北省保定市高二上12月考生物试卷(解析版) 题型:选择题
(2015秋•保定校级月考)下列关于人类活动对群落演替的影响,表述正确的是( )
A.人类活动对群落演替的影响往往是破坏性的
B.人类活动可以任意对生物与环境的关系加以控制
C.演替过程只要不遭到人类的破坏和各种自然力的干扰,其总的趋势是物种多样性会增加
D.人类活动远远超过其他所有自然因素的影响
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科目:高中生物 来源: 题型:选择题
A. | 硝化细菌和哺乳动物成熟的红细胞均无线粒体,两者的生命活动均不需要氧气 | |
B. | 植物的根尖分生区细胞和动物细胞均无叶绿体,两者都不能合成有机物 | |
C. | 植物细胞和动物细胞均有细胞骨架,此结构具有保持细胞内部结构有序性的作用 | |
D. | 肝脏细胞和胰腺细胞中均有溶酶体,被此结构分解后的产物都会排出细胞外 |
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科目:高中生物 来源: 题型:解答题
组别 | 除每天喂养相同的饲料外,进行如下处理 | 在第11天测量并计算每组小鼠肝脏脂肪的平均含量(mmol•L-1) | |
连续11天每天喂下列试剂 | 同时第8天至第11天每天腹腔注射下列物质 | ||
甲组 | 等体积生理盐水 | 等体积生理盐水 | 0.49 |
乙组 | 等体积生理盐水 | 0.025mmol四环素 | 6.51 |
丙组 | 中药制剂(0.05g) | 0.025mmol四环素 | 4.74 |
丁组 | 中药制剂(0.10g) | 0.025mmol四环素 | 4.52 |
戊组 | 中药制剂(0.15g) | 0.025mmol四环素 | 4.10 |
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科目:高中生物 来源: 题型:解答题
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科目:高中生物 来源: 题型:选择题
A. | 甲、乙、丙所示细胞可同时出现在卵巢中 | |
B. | 丙图可能是有丝分裂的图象,其对应丁图的DE段 | |
C. | 乙图细胞的同源染色体对数和染色体组数分别为4和2 | |
D. | 丁图BC段和DE段的细胞中染色体数目肯能相同,DNA数目一定不同 |
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科目:高中生物 来源: 题型:选择题
A. | 已分化的细胞都不能进一步分化 | |
B. | 细胞凋亡对于维持内环境的稳定具有重要作用 | |
C. | 癌症的发生是单一基因突变的结果 | |
D. | 人体细胞在有丝分裂和第二次分裂过程中,染色体数目一定不同 |
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科目:高中生物 来源: 题型:选择题
A. | 细胞分化的结果将造成不同种细胞间蛋白质种类的差异 | |
B. | 个体发育过程中细胞的衰老对于生物体是有利的 | |
C. | 癌变是正常细胞原癌基因和抑癌基因协调表达的结果 | |
D. | 如果能有效地激活肿瘤细胞中的有关凋亡基因,就可能抑制肿瘤的生长 |
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科目:高中生物 来源: 题型:选择题
A. | 细胞2、3分别在胸腺和骨髓中成熟 | |
B. | 细胞1、4、5都有特异性识别抗原的功能 | |
C. | 细胞2、4的高尔基体特别发达 | |
D. | 物质a有特异性,其化学本质是蛋白质 |
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