Question

下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图l、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：

（1）一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前、后，分别含有 、 个游离的磷酸基团。

（2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越 。

（3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是 。

（4）与只使用EcoR I相比较，使用BamHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止 。

（5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入 酶，若两两相连，则连接产物中有哪几种情况? 。

（6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。

（7）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在 的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。

Answer 1