Question

【题目】某生物兴趣小组在“蛋白质的提取和分离”实验中，准备从猪的血液中初步提取血红蛋白，设计的“血红蛋白提取、分离流程图”如下：

（1）样品处理过程中红细胞的洗涤要用________________反复冲洗、离心。向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH＝7.0的缓冲液并充分搅拌，可以破碎红细胞，破碎细胞的原理是_________________________________________。

（2）血红蛋白粗分离阶段，透析的目的是去除________________杂质。

（3）凝胶色谱法又叫______________________，是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离分析技术，由于设备简单、操作方便，不需要有机溶剂，对_____分子物质有很高的分离效果。

（4）电泳法是利用了待分离样品中各种分子的带电性质及分子大小、形状等的差异，而产生不同迁移__________，实现各种分子的分离。常用的电泳法有_______________凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。

Answer 1

【答案】生理盐水 渗透原理（当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时，细胞吸水胀破） 小分子 凝胶色谱技术（或又称分子排阻色谱法、分配色谱法） 高 速率 琼脂糖

【解析】

蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。

（1）洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白，需要用生理盐水反复冲洗、离心。当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时，细胞会吸水胀破，故可以向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH＝7.0的缓冲液并充分搅拌，破碎红细胞。

（2）透析可以去除样品中分子量较小的杂质。

（3）凝胶色谱法又叫分配色谱法，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。该技术对高分子物质有很高的分离效果。

（4）电泳法是利用了待分离样品中各种分子的带电性质及分子大小、形状等的差异，而产生不同迁移速度，实现各种分子的分离。常用的电泳法有琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。