Question

【题目】2019年全国多个城市出台了本市的《生活垃圾分类管理办法》。我们每天产生的塑料垃圾是惊人的，怎样处理塑料垃圾是迫在眉睫的问题。科学家发现了一种能分解聚乙烯（塑料的成分）的微生物——聚乙烯分解菌，它能分泌聚乙烯降解酶降解塑料，从中获取能量。

（1）在筛选聚乙烯分解菌过程中，应选择含___________丰富的垃圾场土壤取样，制作培养基时，应将__________________作为培养基中的唯一碳源，并使用______________灭菌法对培养基进行灭菌。

（2）在制备培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，需先调节培养基的pH，再灭菌倒平板的原因是_______________；倒平板时的温度一般是50°的原因是____________________。

（3）甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定所选土壤样品中聚乙烯分解菌的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果：

甲同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是110、140和149，取平均值133。

乙同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是27、169和176，取平均值124。

这两位同学的结果中，_______________的结果可信度低，其原因_________________________。

（4）为测定聚乙烯降解酶降解塑料的能力，需要先将该分离出来，常用凝胶色谱法，凝胶色谱法分离聚乙烯降解酶的基本过程：样品加入后进行洗脱，而后收集聚乙烯降解酶。最后收集到的蛋白质样品与刚洗脱时收集到的蛋白质相比，分子质量较_______________（填大或小），原因是________________________。

Answer 1

【答案】废旧塑料（聚乙烯） 聚乙烯 高压蒸汽 避免调pH时再次造成微生物污染 温度过高不便于用手操作，温度过低培养基将发生凝固 乙同学 1个平板的计数结果与另2个相差悬殊且不在30-300范围内 小 相对分子质量较大的蛋白质，通过色谱柱的路程较短，移动速率较快

【解析】

1、选择培养基是根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基，可以使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率。

2、微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法接种可用来微生物计数。

3、微生物培养的计数过程中，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。

（1）要筛选聚乙烯分解菌，应选择含废旧塑料（聚乙烯）丰富的垃圾场土壤，制作培养基时，应将聚乙烯作为培养基中的唯一碳源，并使用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。

（2）为避免调pH时再次造成微生物污染，需先调节培养基的pH，再灭菌倒平板。倒平板时的温度一般是50℃的原因是温度过高不便于用手操作，温度过低培养基将凝固。

（3）这两位同学的结果中，乙同学的结果中1个平板的计数结果与另2个相差悬殊，且不在30-300范围内，结果的重复性差，故乙同学的结果可信度低。

（4）在利用凝胶色谱法分离聚乙烯降解酶的过程中分子质量较大的蛋白质不进入凝胶颗粒，通过色谱柱的路程较短，移动速率较快，故最后收集到的蛋白质样品与刚洗脱时收集到的蛋白质相比，分子质量较小。