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    19．癌胚抗原（CEA）是一种位于肿痛细胞膜表面的蛋白，白细胞介素（IL-2）是一种淋巴因子．研究人员利用质粒pIRES、CEA基因、IL-2基因，分别构建了重组质粒pIRES-CEA、pIRES-IL-2、pIRES-CEA-IL-2．将使用小鼠分成6组，每隔5天进行一次肌肉注射，共3次．最后一次注射完成7天后，检测小鼠体内CEA的含量、NK细胞活性等指标，结果如表．
    第1组第2组第3组第4组第5组第6组
    注射物plRES-CEA-IL-2plRES-CEAplRES-IL-2plRES-IL-2与plRES-CEA混合空载体
    plRES    		空白
    CEA含量0.8890.6890.4550.8630.4130.088
    NK细
    胞活性    		0.3950.3890.3970.3970.387　0.091
    淋巴细
    脃数量    		3.041.771.152.181.070.97
    （1）构建重组质粒需要用到的工具酶有限制（性核酸内切）酶、DNA连接酶，其中DNA连接酶对DNA中的碱基序列没有特异性的要求．要保证重组质粒能够在大肠杆菌中大量扩增，重组质粒必须具有复制原点．
    （2）NK细胞的活性不依赖于抗原刺激，能自发地溶解多种肿痛细胞和被病毒感染细胞，属于人体免疫的第二道防线．
    （3）从实验结果看，第1组具有最好的特异性免疫效果．对比第3组和第5组结果可以说明IL-2有促进淋巴细胞增殖的作用．
    （4）第1、2、4组小鼠均可产生CEA抗体，各组之间无显著性差异，但与第3组、空载体及空白对照组相比有显著性差异，说明CEA抗体的产生与导入外源CEA基因，使CEA含量增加有关．

    分析 基因工程技术的基本步骤：
    （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
    （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
    （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
    （4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

    解答 解：（1）构建重组质粒需要用到的工具酶有限制酶、DNA连接酶，其中DNA连接酶对DNA中的碱基序列没有特异性的要求．基因表达载体由目的基因、启动子、终止子、标记基因和复制原点等组件组成，要保证重组质粒能够在细菌中大量扩增，重组质粒必须具有复制原点．
    （2）NK细胞的活性不依赖于抗原刺激，能自发地溶解多种肿痛细胞和被病毒感染细胞，说明为非特异性免疫，属于人体免疫的第二道防线．
    （3）从实验结果看，第1组淋巴细胞数量最多，故具有最好的特异性免疫效果．第3组和第5组的区别在于第三组具有IL-2，对比两者结果可以说明IL-2有促进淋巴细胞增殖的作用．
    （4）第1，2，4组小鼠均可产生CEA抗体，各组之间无显著性差异，但与第3组、空载体及空白对照组相比有显著性差异，说明CEA抗体的产生与导入外源CEA基因，使CEA含量增加有关．
    故答案为：
    （1）限制（性核酸内切）酶、DNA连接酶     DNA连接酶      复制原点
    （2）二
    （3）1   5   淋巴细胞增殖
    （4）CEA抗体的产生与导入外源CEA基因，使CEA含量增加有关

    点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题，能结合所学的知识准确解答项．

    练习册系列答案
    年级 高中课程 年级 初中课程
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    相关习题

    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    12．已知某植物的花色由两对独立遗传的遗传因子决定．显性遗传因子A和B同时存在时，植株开紫花，其他情况开白花．请回答下面相关问题：
    （1）开紫花植株的遗传因子组成有4种，其中遗传因子组成是AaBb的紫花植株自交，子代变现为紫花植株：白花植株=9：7；遗传因子组成为AaBB和AABb的紫花植株各自自交，子代表现为紫花植株：白花植株=3：1；遗传因子组成为AABB的紫花植株自交，子代全部表现为紫花植株．
    （2）杂交实验中发现该植物的果皮颜色（E、e）有紫色的，也有绿色的；果肉味道（F、f）有甜的，也有酸的．为了鉴别有关性状的显隐性关系，用紫色酸果植株分别和绿色甜果植株甲、绿色甜果植株乙进行杂交，结果如下表．据表回答下面相关问题：
    杂交组合类型F1性状表现和植株数目
    紫色酸果绿色酸果
    紫色酸果X绿色甜果（甲）210208
    紫色酸果X绿色甜果（乙）0280
    ①上述两对性状中绿色、酸果是显性性状．
    ②亲本中紫色酸果植株、绿色甜果植株甲、绿色甜果植株乙的遗传因子组成分别是：eeFF、Eeff、EEff．

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    科目：高中生物 来源：2015-2016学年河南三门峡市高二上学期入学考试生物试卷（解析版） 题型：选择题

    下图甲、乙分别表示反射弧组成和神经纤维局部放大的示意图，相关说法正确的是（ ）

    A．在甲图中，①②分别表示感觉神经末梢和运动神经末梢

    B．根据神经纤维受到刺激的瞬间膜内外电荷的分布情况，判断乙图中的a、c为兴奋部位

    C．乙图中在神经元细胞膜内局部电流方向都是由b流向a、c

    D．甲图中的①接受刺激产生的兴奋以电信号的形式在反射弧上进行单向传导

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    7．如图表示菊花的嫩枝和月季的花药离体培养过程，请据图回答下面的问题．

    （1）对菊花来说，要选取生长旺盛的嫩枝来进行组织培养．对月季来说，适宜花粉培养的时期是花粉应处于单核期．为确定该花粉是否处于该时期，最常用的方法是醋酸洋红法．
    （2）植物组织培养过程中A为脱分化，愈伤组织的特点排列疏松，高度液泡化的薄壁细胞．在培养嫩枝组织和花粉的培养基中都要加入一定的植物激素，常用的植物激素有细胞分裂素和生长素．
    （3）月季的花药培养与菊花的嫩枝组织培养不同，从植物产生的途径来说，花粉植株产生的途径除了图中所示外，还可以通过胚状体阶段发育而来，这两种发育途径的差别主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    14．一对夫妇均正常，且他们的双亲也都正常，但双方都有一白个化病的弟弟，求他们婚后生白化病孩子的概率是（　　）
    A．$\frac{1}{3}$B．$\frac{2}{3}$C．$\frac{1}{6}$D．$\frac{1}{9}$

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    4．如图为神经元及突触的结构示意图，乙处距离甲、丙处的距离相等．下列相关叙述正确的是（　　）
    A．甲处兴奋时该细胞才能合成神经递质
    B．刺激乙处，甲、丙同时兴奋时神经纤维膜外均为正电位
    C．丙处突触小泡释放神经递质与膜的流动性有关
    D．丙处释放的神经递质可通过胞体膜进入下一个神经元

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    11．转基因实验表明，转入了海蜇绿色荧光蛋白基因的转基因鼠，在紫外线的照射下能像海蜇一样的发光．请回答下列问题：
    （1）已知的绿色荧光蛋白基因是从海蜇体细胞中提取出的一种基因，提取它时通常利用的酶是限制性内切酶．
    （2）利用PCR技术扩增DNA时，需要在反应体系中添加的有机物质有引物、模板DNA、4种脱氧核糖核苷三磷酸和热稳定DNA聚合（或Taq）酶，扩增过程可以在PCR扩增仪中完成．
    （3）若将含海蜇绿色荧光蛋白基因的重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞中，则常用的方法是显微注射技术．
    （4）欲进一步将已导入了重组质粒的猪胎儿成纤维细胞培养成带有绿色荧光蛋白质的转基因猪，还需利用
    细胞核移植（或体细胞核移植）技术，将导入了重组质粒的猪胎儿成纤维细胞的细胞核移植到去核的猪的卵母细胞中，从而形成重组细胞，再进一步培养成早期胚胎，通过胚胎移植技术转移到猪的子宫中，从而得到绿色荧光蛋白转基因克隆猪．
    （5）科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因，并用基因工程的方法将该基因导入金茶花叶片细胞的染色体DNA上，经培养长成的植株具备了抗病性，这说明目的基因（或抗枯萎病基因）已表达．如果把该基因导入叶绿体DNA中，将来产生的配子中不一定（填“一定”或“不一定”）含有抗病基因．

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    8．如图表示某生物（甲）细胞处于有丝分裂各阶段细胞核中DNA和细胞质中m RNA含量变化，以及细胞周期各阶段的时长，请回答下列问题：

    a=3.4  b=7.9  c=2.2  d+e=1.8 （h）
    （1）核糖体功能较活跃的时期是a、c，这表明在该时期进行了大量的蛋白质 的合成．
    （2）着丝点分裂，染色体数目加倍发生在d 期（用图中字母表示），分开的两条染色体被纺锤丝牵引着移向细胞的两极．
    （3）若用放射性同位素的胸苷（DNA复制的原料之一）短期培养上述细胞后，处于b期的细胞都会被标记．洗脱含放射性同位素的胸苷，换用无放射性的新鲜培养液培养，定期检测．预计最快约2.2h后会检测到被标记的分裂期细胞．
    （4）另有某种生物（乙）的细胞周期时长为24h，分裂期时长为1.9h．若要在显微镜下观察细胞有丝分裂过程中染色体形态的变化，选用甲（甲或乙）细胞更合适．

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    科目：高中生物 来源：2015-2016学年河北省高二上学期第一次月考生物试卷（解析版） 题型：选择题

    下列各项中，可视为物质进入内环境的实例的是（ ）

    A．精子进入输卵管腔

    B．牛奶被饮入胃中

    C．氧进入血液中的红细胞里

    D．胰岛素被注射到皮下组织中

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