Question

4．如图为细胞融合的简略过程，请据图问答：
（1）植物细胞工程常用的技术手段有植物组织培养、植物体细胞杂交．动物细胞工程的各技术手段中的基础是动物细胞培养．
（2）若图中A、B是植物细胞，在细胞融合之前应用纤维素酶、果胶酶处理，除去细胞壁；A、B到细胞C的过程中，常用的化学方法是PEG诱导；融合完成的标志是再生出细胞壁．
（3）与植物细胞相比，动物细胞融合特有的诱导融合的方法是灭活的病毒．
（4）若利用动物细胞融合技术来生产单克隆抗体，应采用经免疫的B细胞和骨髓瘤细胞两种细胞进行融合，融合后需经多次筛选，以得到能产特异抗体的杂交瘤细胞，第一次筛选一般利用选择培养基进行，第二次筛选需对细胞进行反复的克隆化培养和抗体阳性检验，以筛选出能产特定抗休的杂交瘤细胞．
（5）少量生产单克隆抗体时，可将筛选得到的杂交瘤细胞注入到小鼠腹腔内繁殖，该方法的优点是节约培养基（成本），易于控制培养条件等．

Answer 1

分析 1、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较：

项目	细胞融合原理	细胞融合方法	诱导手段	用途
植物体细胞杂交	细胞膜的流动性，（细胞的全能性）	去除细胞壁后诱导原生质体融合	离心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导	克服远缘杂交不亲和，获得杂交植株
动物细胞融合	细胞膜的流动性	使细胞分散后，诱导细胞融合	离心、电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导	制备单克隆抗体的技术之一

2、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体．

解答 解：（1）植物细胞工程常用的技术手段有植物组织培养、植物体细胞杂交．动物细胞工程的各技术手段中的基础是动物细胞培养．
（2）植物体细胞杂交前，先采用酶解法去除细胞壁，即采用纤维素酶、果胶酶处理除去细胞壁；诱导细胞融合常用的化学方法是PEG诱导；原生质体融合完成的标志是再生出细胞壁．
（3）诱导原生质体融合的方法有物理法（离心、振动、电激等）、化学法（聚乙二醇），诱导动物细胞融合的方法有物理法（离心、振动、电激等）、化学法（聚乙二醇）和生物法（灭活的病毒）．因此，与植物细胞相比，动物细胞融合特有的诱导融合的方法是灭活的病毒．
（4）若利用动物细胞融合技术来生产单克隆抗体，应将经免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合，融合后需经多次筛选，以得到能产特异抗体的杂交瘤细胞，第一次筛选一般利用选择培养基进行，第二次筛选需对细胞进行反复的克隆化培养和抗体阳性检验，以筛选出能产特定抗休的杂交瘤细胞．
（5）少量生产单克隆抗体时，可将筛选得到的杂交瘤细胞注入到小鼠腹腔内繁殖，该方法的优点是节约培养基（成本），易于控制培养条件等．
故答案为：
（1）植物组织培养、植物体细胞杂交     动物细胞培养
（2）纤维素酶、果胶酶    细胞壁    PEG诱导    再生出细胞壁
（3）灭活的病毒
（4）经免疫的B细胞    骨髓瘤细胞    选择培养基    克隆化培养和抗体阳性检验
（5）节约培养基（成本），易于控制培养条件等

点评 本题考查植物体细胞杂交和单克隆抗体的制备，要求考生识记植物体细胞杂交的具体过程；识记单克隆抗体的制备过程，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．