Question

16．生物工程是改造生物的结构与功能的手段之一．生物工程的各主要领域并不是各自独立的，而是相互联系、相互渗透的．它们之间的关系示意如图：

（1）基因工程中使用T₄DNA连接酶“缝合”双链DNA片段的平末端末端时，连接效率比较低．其连接形成的化学键称为磷酸二脂键．
（2）筛选抗癌药物经常要运用动物细胞培养技术；单克隆抗体的生产过程利用了生物工程中的动物细胞融合技术．
（3）若利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗性基因的受体细胞，应使重组Ti质粒中含有抗卡那霉素基因，作为标记基因．
（4）将导入目的基因的细胞培养成优良植物品种，采用的是植物组织培养技术．
（5）从个体水平鉴定转基因的优良植物品种是否培育成功的方法是确定优良性状是否表达．

Answer 1

分析 1、基因工程的工具：
（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．
（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键．
（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒．
2、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
3、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体．

解答 解：（1）根据酶的来源不同，DNA连接酶可分为E．coliE．coliE．coliDNA连接酶和T₄DNA连接酶两类，这二者都能连接黏性末端，此外T₄DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低．DNA连接酶连接形成的化学键称为磷酸二脂键．
（2）动物细胞培养技术可用于筛选抗癌药物；单克隆抗体的生产过程利用了生物工程中的动物细胞融合技术、动物细胞培养技术．
（3）若利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗性基因的受体细胞，应使重组Ti质粒中含有抗卡那霉素基因，作为标记基因．
（4）将转基因植物细胞培育成转基因植株需要采用植物组织培养技术．
（5）从个体水平鉴定转基因的优良植物品种是否培育成功的方法是确定优良性状是否表达．
故答案为：
（1）平末端                磷酸二脂键
（2）动物细胞培养          动物细胞融合
（3）抗卡那霉素基因
（4）植物组织培养
（5）确定优良性状是否表达

点评 本题考查基因工程和细胞工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作工具及其作用；识记单克隆抗体的制备过程，能结合所学的知识准确答题．