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    14．目前临床上癌症治疗的方法，一般是手术切除肿瘤，为防止体内残留癌细胞，在手术后进行化疗．某生物兴趣小组的同学从资料上获知：二氯二乙胺能够阻止参与DNA复制的酶与DNA相互作用．他们推测：二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖，能作为一种癌症的化疗药物，并就此问题设计实验进行了探究．
    实验材料：肝部长有肿瘤的小鼠，二氯二乙胺溶液，蒸馏水，生理盐水，含有全部营养物质的细胞培养液，显微镜，血球计数板，试管，吸管，培养皿等．
    （1）其中某位同学实验操作如下：（请将实验内容补充完整）
    a．取洁净的培养皿一个，加入适量的培养液，从小鼠肝部切取肿瘤组织，剪碎，并用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理，使其分散开来，配制成细胞悬液，将其均匀分成5份，置于5个培养皿中培养，分别编号．
    b．取洁净的试管5支，加入等量的培养液，编号1、2、3、4、5，并在1-4号试管中加入等量的不同浓度的二氯二乙胺溶液，5号试管中加入等量生理盐水（或等量细胞培养液），作为对照组．
    c．将步骤b中的配制的溶液分别置于5个培养皿中，摇匀后，在冰箱中培养一段时间．
    d．在5个培养皿加入适量的胰蛋白酶处理，配制相应的细胞悬液，振荡摇匀，分别吸取适量的悬液置于血球计数板内，在显微镜下计数，记录数据．
    （2）请你纠正上面这位同学操作上的错误在“冰箱中”应改为在“CO2培养箱”或“适宜的温度和气体环境”．
    （3）另一位同学按照正确的方法进行实验，得到的结果如表：
    实验组别12345
    二氯二乙胺浓度（mg/ml）0.10.20.30.40
    细胞数目（个/mL）32027518696560
    a．在该实验中，自变量是二氯二乙胺的浓度．
    b．根据实验结果，你能得出的结论是二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖，且在一定范围内，随二氯二乙胺浓度的增大，抑制作用逐渐增强．
    （4）在体外培养肿瘤细胞时，除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外，需要提供CO2气体以维持PH值，还需要提供无菌、无毒环境环境，合成培养基需特别添加动物血清．
    （5）若开始培养时取一滴培养液观察有100个肿瘤细胞，经24h培养后，取一滴稀释100倍后再取一滴（设三次的“一滴”等量）观察，发现有64个肿瘤细胞，此肿瘤的细胞周期约为4h．

    分析 分析题目可知，癌细胞的增殖应在“适宜温度下”或“恒温箱中”才可完成，试管静置时，其内的溶液会出现沉淀，吸取培养液时所得每毫升中细胞的数目不准确，因此应摇匀后再吸取．由表中数据可知，二氯二乙胺能抑制癌细胞增殖，且抑制效果与浓度有关；实验设计应遵循对照原则和单一变量原则．

    解答 解：（1）a．胰蛋白酶能水解细胞表面的蛋白质，是组织细胞分散开，所以动物细胞培养常用胰蛋白酶处理．
    b．实验设置应遵循对照原则，所以取洁净的试管5支，加入等量的培养液，编号1、2、3、4、5，并在1-4号试管中加入等量的不同浓度的二氯二乙胺溶液，5号试管中加入 等量的生理盐水，和前4只试管进行对照．
    d．进行细胞计数时需要使用血球计数板计数法，所以从震荡摇匀的5支试管中吸取适量的培养液置于血细胞计数板内，在显微镜下计数，记录数据．
    （2）分析实验步骤可知，在操作过程中的错误为：在“冰箱中”应改为在“CO2培养箱”或“适宜的温度和气体环境”．
    （3）a．在该实验中，自变量是二氯二乙胺的浓度．
    b．根据实验结果，得出的结论是二氯二乙胺能抑制癌细胞增殖；且在一定的范围内，随二氯二乙胺浓度增大，抑制作用逐渐增强．
    （4）在体外培养肿瘤细胞时，除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外，提供CO2气体以维持PH值，还需要提供无菌、无毒环境环境，合成培养基需特别添加动物血清．
    （5）100×2n=64×100（n为分裂次数），求得n=6，则细胞周期为24÷n=24÷6=4h．
    故答案为：
    （1）a．胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）    b． 等量生理盐水（或等量细胞培养液）   对照   d．血球计数板
    （2）在“冰箱中”应改为在“CO2培养箱”或“适宜的温度和气体环境”
    （3）a．二氯二乙胺的浓度
    b．二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖，且在一定范围内，随二氯二乙胺浓度的增大，抑制作用逐渐增强
    （4）CO2     无菌、无毒环境     动物血清
    （5）4

    点评 本题结合癌细胞的特征和导致癌细胞产生的机理相关内容，考查了学生试验设计能力，实验设置的对照原则和单一变量的原则，主要考查学生对实验的分析评价和完善的能力，处理实验数据获取结论的能力．

    练习册系列答案
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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

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    （2）图甲中2所示结构是核孔，代谢旺盛的细胞该结构数目多．
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