Question

【题目】【生物——选修3：现代生物科技专题】

神经营养因子（NTF）能促进神经元的存活和再生。已知NTF基因能得到克隆。回答下列问题：

（1）在体外，可通过PCR技术扩增NTF基因，该技术依据的原理是______________。为何保证PCR反应的进行，反应体系需要加入______________酶、模板DNA、dCTP、dATP、dGTP、dTTP、______________等。在打开DNA双链时需要_______________________。

（2）将外源NTF基因导入受体细胞常用的方法是_____________，检测其是否已表达，可采用______________方法。

（3）与转基因工程菌相比，利用真核细胞作为受体得到的NTF才有生物活性，其原因可能是______________。

Answer 1

【答案】 DNA双链复制 Taq（热稳定DNA聚合） 引物 提高温度（高温90—95℃等合理答案） 显微注射法 抗原—抗体杂交法 NTF合成后需要经过内质网、高尔基体的加工才具备生物活性

【解析】试题分析：目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。

（1）PCR技术依据的原理是DNA双链复制．为了保证PCR反应的进行，反应体系需要加入耐高温Taq（DNA聚合）酶、模板DNA、dCTP、dATP、dGTP、dTTP、引物等，PCR技术不要加解旋酶，提高温度时，DNA双链就能打开。

（2）将外源NTF基因导入受体细胞常用的方法是显微注射法，检测目的基因是否翻译成蛋白质即是否表达，可以利用抗原-抗体杂交技术来检测。

（3）原核细胞只有核糖体，没有其它细胞器，因此与转基因工程菌（大肠杆菌）相比，利用真核细胞作为受体得到的NTF才有生物活性，原因是NTF合成后需要经过内质网、高尔基体的加工才具备生物活性。