Question

16．如图为培育转基因小鼠的部分过程示意图．请回答下列问题．

（1）获取目的基因是实施基因工程的第一步．
（2）图中的A细胞通常为受精卵细胞，将外源基因导入该细胞常用的方法是显微注射法．
（3）仔鼠出生后可用其尾巴进行DNA检测，通过DNA分子杂交方法，检测出携带外源基因的小鼠．至于外源基因是否合成相应的蛋白质，可从转基因小鼠中提取蛋白质，并用相应的（单克隆）抗体与提取的蛋白质者进行杂交，若能杂交，则表明小鼠体内的外源基因已表达．
（4）在外源基因导入小鼠的A细胞时，外源基因可能随机地插入到该细胞的DNA中．这些细胞有的能发育成转基因小鼠，有的却死亡．请分析外源基因插入后导致有些A细胞死亡的最可能原因外源基因的插入使受精卵内生命活动必需的某些基因不能正常表达．

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达．
（2）培育转基因动物常以受精卵作为受体细胞，因为受精卵的全能性最高；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法．
（3）检测外源基因是否导入受体细胞用DNA分子杂交技术；检测是否成功表达蛋白质采用抗原-抗体杂交技术，即从转基因小鼠中提取蛋白质，并用相应的（单克隆）抗体与提取的蛋白质者进行杂交，若能杂交，则表明小鼠体内的外源基因已表达．
（4）外源基因的插入使受精卵内生命活动必需的某些基因不能正常表达，进而导致细胞死亡．
故答案为：
（1）获取目的基因
（2）受精卵　显微注射法
（3）DNA分子杂交　（单克隆）抗体　已表达
（4）外源基因的插入使受精卵内生命活动必需的某些基因不能正常表达

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题．