Question

【题目】急性肠胃炎是由细菌通过消化道进入人体导致的。因此检验饮用水的细菌含量是有效监控疾病发生的必要措施，请回答下列与检验饮用水有关的问题：

（1）配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的基本步骤：计算→称量→溶化→灭菌→__________。

（2）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种接种方法称为____________。

（3）用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组__________，为什么?__________。

（4）如分别取 0．1 mL 已稀释 102 倍的水样分别涂布到三个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为 52、 55 、 58 ，则每升原水样中大肠杆菌数为__________。 与用显微镜直接计数法相比，此计数方法测得的细菌数目较__________（填“多”或“少”）。

（5）已知大肠杆菌能发酵乳糖并产酸产气，现提供足量的已灭菌的乳糖蛋白胨培养液和具塞试管，应如何判断待检水样中是否含有大肠杆菌？请写出大致的实验思路。

_____________________________。

Answer 1

【答案】倒平板 稀释涂布平板法 需要 因为需要判断培养基是否被杂菌污染（培养基灭菌是否合格） 5．5×107 少 通过无菌操作向试管内注入一定量待检水样，再注入已灭菌的乳糖蛋白胨培养液将试管充满，塞上塞子，混匀后置于37℃恒温箱培养24h。若试管内有气泡生成，则说明水样中有大肠杆菌 (也可以用PH试纸检测PH变化）。

【解析】

对目的微生物筛选时，稀释涂布平板法适用于对微生物的计数，用该方法进行计数时需要做对照试验以排除培养基污染造成的误差。

（1）配制琼脂培养基的基本步骤：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。

（2）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种接种方法称为稀释涂布平板法。

（3）用该方法统计样本菌落数时需要设置对照组，因为需要判断培养基是否被杂菌污染（培养基灭菌是否合格）。

（4）每升原水样中大肠杆菌数为：（52+55+58）÷3×10000×102=5.4×107个；与用显微镜直接计数法相比，此计数方法测得的细菌数目较少。

（5）检测水样中是否含有大肠杆菌的方法是：通过无菌操作向试管内注入一定量待测水样；再注入已灭菌的乳糖蛋白胨培养液将试管充满，塞上塞子，混匀后置于37℃恒温箱培养24h。若试管内有气泡生成，则说明水样中有大肠杆菌（也可以用PH试纸检测PH变化）。