Question

16．某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A．研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）．实验的主要步骤如图所示．请分析回答下列问题．

（1）目的菌株生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的有机化合物A．实验需要振荡培养，由此推测目的菌的代谢类型是异养需氧型．
（2）培养若干天后，应该选择培养瓶中化合物A含量最少的培养液，接入新的培养液中连续培养，使目的菌的数量增多．
（3）接种于固体培养基时，常采用平板划线法和稀释涂布平板法法进行接种．平板划线法所用的接种工具是
接种环，这种工具操作时应采用的灭菌方法是灼烧灭菌．接种时，在第二次及其后的划线操作时，总是从上一次划线末端开始划线．
（4）某同学将污水样液制成了稀释倍数为l0¹-10⁴的四个稀释样液，分别取0.1mL接种到固体选择培养基上，若在10³组的3个平板上，获得的菌落数是39、38和37，则每升污水样液中的活菌数约为3.8×10⁸个．
（5）如果对分离出的细菌进行长期保存，常采用的方法是甘油管藏法．

Answer 1

分析 分析题干信息：该实验的目的是筛选出高效降解化合物A的细菌，在以化合物A为唯一碳源的培养基中只有能降解化合物A的微生物才能以化合物A为碳源和氮源生长繁殖，不能利用化合物A的微生物因缺乏碳源和氮源，无法生长繁殖．

解答 解：（1）分析培养基的配方可知，该培养基由化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制而成，因此化合物A为目的菌提供了碳源和氮源；实验需要振荡培养，说明目的菌为的异化作用类型为需氧型，因此目的菌的代谢类型是异养需氧型．
（2）目的菌分解化合物A的能力越强，培养液中化合物A的含量越低，因此培养若干天后，应该选择培养瓶中化合物A含量最少的培养液，接入新的培养液中连续培养，使目的菌的数量增多．
（3）接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法．平板划线法所用的接种工具是接种环，对于接种环的灭菌方法应该是灼烧灭菌．接种时，在第二次及其后的划线操作时，总是从上一次划线末端开始划线，因此每次划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落．
（4）某同学将污水样液制成了稀释倍数为l0¹-10⁴的四个稀释样液，分别取0.1mL接种到固体选择培养基上，若在10³组的3个平板上，获得的菌落数是39、38和37，则每升污水样液中的活菌数约为$\frac{39+38+37}{3}$×$\frac{1}{0.1}{×10}^{3}$×10³=3.8×10⁸个．
（5）如果对分离出的细菌进行长期保存，常采用的方法是甘油管藏法．
故答案为：
（1）有机化合物A     异养需氧型
（2）最少
（3）稀释涂布平板法    接种环     灼烧灭菌     上一次划线末端
（4）3.8×10⁸
（5）甘油管藏法

点评 本题考查微生物的培养与运用相关知识，意在考查考生微生物培养与选择的实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用能力．