Question

【生物-选修3：现代生物科技专题】已知pUC质粒上携带有IacZ+基因的一段序列，编码β-半乳糖苷酶的α肽。而宿主细胞含有IacZ+的突变基因，其产物无β-半乳糖苷酶活性，但遇α肽，可发生α-互补作用，产生有活性的酶，使培养基中的无色物质X-Gal分解，菌落呈蓝色；若将外源基因插入到质粒上IacZ+序列中，失去α-互补作用（注：宿主细胞菌落为白色）。图甲为pUC质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，tctR为四环素抗性基因，P为启动子、T为终止子，ori为复制原点。图乙表示目的基因的两端分别有EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。为获得目的菌株，请分析回答下列问题：

（1）为快速筛选目的基因，应将含有目的基因的DNA与pUC质粒表达载体分别用 酶切，酶切产物用 进行连接后将得到的混合物直接导入受体菌中，培养受体菌有的未被转化（用A表示），有的被转化，被转化的菌株有三种（B含环化目的基因的菌株 C含质粒载体的菌株 D含插入了目的基因的重组质粒的菌株）。

（2）为筛选出插入了目的基因的菌株，需要将宿主细胞接种在含有 的培养基中。

（3）在培养基中，不能生长的菌株为 ；产生蓝色菌落的菌株为 ；产生白色菌落的菌株为 （请用（1）中的A、B、C、D字母作答）。

（4）基因工程中除质粒作为基因载体外，还可用动植物病毒和 。

Answer 1