Question

【题目】微生物接种是微生物培养中非常重要的技术环节。下图是关于接种的操作步骤示意图。请据图回答有关问题。

（1）图中接种工具的名称是___________，步骤②中，灼烧后必须先将接种工具冷却的原因是_______。

（2）步骤③中进行划线操作的目的是______________，划线时一般不能划破培养基的原因可能有_____。

（3）分别用三个平板培养三种细菌（E.coli、S.albus、B.subtilis），然后在培养基上分别滴一滴一定浓度的青霉素溶液，经过一定时间培养后，可以观察到一圈清晰区，这是抑制细菌生长所致。测量清晰区的直径，数据如下表。

细菌	不同浓度青霉素条件下清晰区直径（mm）
	5μg/mL	7.5μg/mL	10μg/mL	15μg/mL	20μg/mL
E.coli	7	10	16	16	16
S.albus	0	5	8	13	17
B.subtilis	5	7	9	14	19

该实验的目的是_____________。从表中数据可以看出，10μg/mL青霉素和20μg/mL青霉素在抑制E.coli、S.albus上的区别是______________、___________。

（4）利用选择培养基可以筛选微生物，制备培养基时，灭菌和调PH的先后顺序是___________，在利用高压蒸汽灭菌锅对培养基灭菌时，锅内水加热煮沸后，必须___________，以保证灭菌温度达到121℃。

Answer 1

【答案】 接种环 避免高温杀死接种物 分离微生物（或分离细菌、分离菌种） 微生物接种于裂口内，摄取营养受限，生长空间变小，培养基的沟槽造成菌落形态改变，从而影响对菌落形态的观察及特征鉴别 探究不同浓度青霉素对不同细菌的抑制作用 在控制S.albus方面，20μg/mL青霉素的效用是10μg/mL青霉素的两倍 在控制E.coli方面，10μg/mL和20μg/mL青霉素的效用没有差异 先调PH，再灭菌 将锅内冷空气彻底排除

【解析】试题分析：结合题意，以图示信息和表中数据为切入点，围绕培养基、无菌技术、实验操作、纯化微生物的方法等相关基础知识，对相关的问题情境进行作答。

(1) 图中的接种工具是接种环，步骤②中，灼烧后必须先将接种工具冷却的原因是避免高温杀死接种物。

(2) 步骤③是采用平板划线法对微生物进行接种，其中进行划线操作的目的是分离微生物（或分离细菌、分离菌种）。划线时一般不能划破培养基的原因可能有：微生物接种于裂口内，摄取营养受限，生长空间变小，培养基的沟槽造成菌落形态改变，从而影响对菌落形态的观察及特征鉴别。

(3)依题意和表中信息可知：该实验的目的是探究不同浓度青霉素对不同细菌的抑制作用。在控制S.albus方面，20μg/mL青霉素的效用是10μg/mL青霉素的两倍；在控制E.coli方面，10μg/mL和20μg/mL青霉素的效用没有差异。

(4) 制备培养基时，应先调PH，再灭菌。在利用高压蒸汽灭菌锅对培养基灭菌时，锅内水加热煮沸后，必须将锅内冷空气彻底排除，以保证灭菌温度达到121℃。