Question

【题目】a干扰素是由人的白细胞产生的一种蛋白质,是抗病毒的一类特效药,人类利用基因工程技术已经大批量生产a干扰素。请分析回答下列问题:

(1)利用逆转录的方法合成干扰素基因,不能从上皮细胞中提取mRNA,原因是______;这种方法合成的基因与细胞内的基因相比,一般没有______、启动子、终止子等结构。

(2)根据α干扰素基因的脱氧核苷酸序列设计并合成引物,利用______技术可得到大量的α干扰素基因。

(3)基因工程中利用的工具酶有______,最常用的载体是______。

(4)将重组DNA导入大肠杆菌细胞时,需用______处理细胞使其成为______细胞。

Answer 1

【答案】上皮细胞中α干扰素基因不转录内含子PCR限制酶、DNA连接酶质粒Ca2+感受态

【解析】

基因工程常考的3种基本工具：

(1)限制性核酸内切酶：识别特定核苷酸序列，并在特定位点上切割DNA分子。

(2)DNA连接酶：①E·coliDNA连接酶只能连接黏性末端；②T4DNA连接酶能连接黏性末端和平末端。

(3)运载体：①能在宿主细胞内稳定存在并大量复制；②有一个至多个限制酶切割位点；③具有特殊的标记基因——以便对含目的基因的受体细胞筛选。

（1）α干扰素是由人的白细胞产生的一种蛋白质，上皮细胞不能转录α干扰素的基因。用逆转录法合成的基因没有启动子、终止子、内含子等结构，必须构建基因表达载体后，才能在受体细胞中表达。

（2）要得到大量的α干扰素基因，可利用PCR扩增技术。

（3）基因工程技术需要用到三种工具，DNA连接酶和限制酶是基因工程中利用的工具酶，质粒是最常用的载体。

（4）将目的基因导入微生物细胞常用感受态转化法，即常用Ca2+处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞，在一定温度条件下完成转化。