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    下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料，请分析回答下列问题．
    资料1：巴斯德毕赤酵母菌是一种甲基营养型酵母菌，能将甲醇作为其唯一碳源，此时AOX1基因受到诱导而表达[5′AOX1和3′AOX1（TT）分别是基因AOX1的启动子和终止子]．
    资料2：巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒，所以科学家改造出了图1所示的pPIC9K质粒用作载体，其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组，将目的基因整合于染色体中以实现表达．

    （1）如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，应该在HBsAg基因两侧的A和B位置接上
     
    、
     
    限制酶识别序列，这样设计的优点是避免质粒和目的基因自身环化．
    （2）酶切获取HBsAg基因后，需用
     
    将其连接到pPIC9K质粒上，形成重组质粒，并将其导入大肠杆菌以获取
     
    ．
    （3）步骤3中应选用限制酶
     
    来切割重组质粒获得重组DNA，然后将其导入巴斯德毕赤酵母菌细胞．
    （4）为了确认巴斯德毕赤酵母菌转化是否成功，在培养基中应该加入卡拉霉素以便筛选，转化后的细胞中是否含有HBsAg基因，可以用
     
    方法进行检测．
    （5）转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后，需要向其中加入
     
    以维持其生活，同时诱导HBsAg基因表达．
    （6）与大肠杆菌等细菌相比，用巴斯德毕赤酵母菌细胞作为基因工程的受体细胞，其优点是在蛋白质合成后，细胞可以对其进行
     
    并分泌到细胞外，便于提取．
    考点：基因工程的原理及技术
    专题：
    分析：分析题图：图1所示为科学家改造后形成的pPIC9K质粒，可用作基因工程的载体；图2为含有目的基因（HBsAg）的外源DNA分子．首先用pPIC9K质粒作载体，与目的基因形成的重组质粒；步骤1表示将目的基因导入受体细胞的过程；步骤2表示目的基因随着大肠杆菌的繁殖而扩增；步骤3表示切割重组质粒获得重组DNA，然后将其导入巴斯德毕赤酵母菌细胞．
    解答： 解：（1）重组质粒上的目的基因若要表达，需要目的基因的首尾含有启动子和终止子．而SnaBⅠ、AvrⅡ识别的序列在启动子和终止子之间，只要在目的基因两侧的A和B位置分别接上这两种序列，并用SnaBⅠ、AvrⅡ这两种限制酶对质粒和目的基因同时进行切割，便会各自出现相同的黏性末端，便于重组与表达，同时可防止自身环化，因此在HBsAg基因两侧的A和B位置应接上SnaBⅠ和AvrⅡ限制酶的识别序列．
    （2）①用DNA连接酶可将切割后的HBsAg基因和pPIC9K质粒连接成重组质粒；②将重组质粒导入大肠杆菌体内，目的是利用大肠杆菌的无性繁殖，短时间内获取大量的重组质粒．
    （3）重组DNA的两侧分别是启动子和终止子，除BglⅡ外，其他限制酶均会破坏含有启动子和终止子的目的基因．
    （4）检测目的基因是否导入受体细胞常采用DNA分子杂交技术．
    （5）资料1显示，甲醇为该酵母菌的唯一碳源，同时可诱导HBsAg基因表达．
    （6）酵母菌为真核生物，细胞内具有能对分泌蛋白进行加工的内质网和高尔基体等细胞器，而大肠杆菌等原核生物不具有内质网和高尔基体等细胞器．
    故答案为：
    （1）SnaBⅠAvrⅡ
    （2）DNA连接酶    大量重组质粒
    （3）BglⅡ
    （4）DNA分子杂交
    （5）甲醇
    （6）加工（修饰）
    点评：本题结合将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程图，考查基因工程的原理及技术，要求考生识记基因工程的原理、工具及操作步骤，能结合题干和图中信息答题，有一定难度．
    练习册系列答案
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    科目：高中生物 来源： 题型：

    帕金森氏病是中老年人最常见的中枢神经系统变性疾病，病因与无法制造足够的多巴胺（神经递质）有关．酪氨酸羟化酶是人体合成多巴胺的关键酶之一．科学家利用利用病毒将人酪氨酸羟化酶（TH）基因导入大鼠骨髓基质细胞bMSCs（一类多能干细胞），并获得稳定表达，如图．该实验成果对帕金森病的基因治疗具有重要意义．

    根据上述资料回答有关问题：
    （1）该实验过程涉及的生物技术有
     
    ．
    （2）导入绿色荧光蛋白（EGFP）基因的目的是
     
    ．
    （3）用骨髓基质细胞做受体细胞是利用该细胞的
     
    能力．目前，实验中使用的骨髓基质细胞通常为10代以内，这是为了保持细胞
     
    ．
    （4）下列有关该实验的分析正确的有
     
    ．
    A．该实验利用病毒作为运载体
    B．获取大鼠四肢骨的骨髓基质细胞时可利用胃蛋白酶制备细胞悬液
    C．人的基因能够在大鼠细胞中表达的基础原理是不同生物共用一套遗传密码
    D．科学家实现了将人酪氨酸羟化酶基因导入帕金森病人体内，进而修复病人体内有缺陷的基因．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    如图为光合作用中的物质转变（用实线表示）与能量传递（用虚线表示）的模式图．图中a～g为物质，①～⑥为反应过程．请据图作答：

    （1）写出下列物质与过程的名称：a
     
    ；④
     
    ．
    （2）在g物质供给充足时，植物从暗处移到光处后，C3的变化是
     
    ．
    （3）下列实验过程与图中哪个过程有直接关系？（用①～⑥符号表示）
    a、在盛满水的玻璃管上端插入带叶枝条，它的下端浸入盛满水银的容器中，把它放在通风透光的地方，就可观察到水银沿玻璃管上升．
     

    b、英国科学家普里斯特利将小鼠与绿色植物一起放在玻璃罩内，小鼠不易死亡．
     

    c、德国科学家萨克斯把绿叶放在暗处几小时后，把这个叶片一半曝光，另一半遮光．一段时间后，用碘蒸汽处理叶片．
     

    d、美国科学家鲁宾与卡门在密闭容器中把植物进行光照，且让被光照的绿色植物吸收含18O的水，一段时间后，观察到容器中的某种气体含18O．
     
    ．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    回答下列有关生物技术问题：
    （1）继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展．最近，科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中．请回答：
    ①进行基因转移时通常将外源基因转入受精卵中，原因是
     

    ②如果将外源基因导入小鼠受精卵，则外源基因可能随机插入到小鼠受精卵DNA中．这种受精卵有的可发育成转基因小鼠，有的却死亡．请分析因外源基因插入导致受精卵死亡的最可能原因
     
    ．
    ③通常采用
     
    技术检测外源基因是否插入了小鼠基因组．
    ④在研制膀胱生物反应器时应使外源基因在小鼠
     
    细胞中特异表达．
    （2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行
     
    （消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和
     
    ；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能
     
    ．
    （3）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染．对于固体培养基应采用的检测方法是
     
    ．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    科学工作者通过蒸因工程创造出了“蜘蛛羊”，该羊的乳汁中含有蛛丝蛋白，高强度的蛛丝蛋白可用于许多重要的特种工业领域．请回答：
    （1）为保证实验成功，产生蛛丝蛋白的基因需要从
     
    （基因组/c DNA）文库中获取，并与
     
    等调控组件重组在一起，然后与载体相连构建成表达载体；再通过
     
    方法，将表达载体导入羊的
     
    ，获得重组细胞．
    （2）将获得的重组细胞培养成早期胚胎后，移植到经过处理的受体母羊子宫内．因为我们对细胞所需的营养条件还没有完全研究清楚，所以在早期胚胎的培养中，往往还需要添加
     
    ．若需要一次产生两头转基因“蜘蛛羊”可将早期胚胎进行
     
    处理．
    （3）若所得到的“蜘蛛羊”（已知表达载体已进入细胞）乳汁中没有检测到蛛丝蛋白，科学家为判断问题所在，应该采用
     
    技术来检测．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    如图表示一个水稻叶肉细胞内发生的部分代谢简图．图中①～⑤表示反应过程，A～L表示细胞代谢过程中的相关物质，a、b、c表示细胞的相应结构．请据图作答：

    （1）如图中，反应过程①的场所是
     
    ，过程⑤反应的场所是
     
    ，K指的物质是
     
    ．
    （2）结构a中发生的能量转换过程是
     
    ．在其他环境条件适宜而光照强度恰为光补偿点（光合速率等于呼吸速率时的光照强度）时，单位时间内A～L各物质的量的关系为
     
    ．
    A．A＜B            B．E=F             C．G=I            D．D＜K
    （3）叶肉细胞在③④⑤过程中，产生能量最多的过程是
     
    ．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    下列关于生物大分子的叙述，正确的是（　　）
    A、蛋白质是由多个氨基酸分子通过肽链相互连接而成的高分子化合物
    B、DNA是一切生物的遗传物质
    C、纤维素是一种多糖，是构成植物细胞壁的主要成分
    D、淀粉在动植物细胞中普遍存在

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    下列对概念图的描述不正确的是（　　）
    选项ABCD
    概念图
    1化学元素脂质有机物糖类
    2大量元素固醇类蛋白质多糖
    3微量元素激素胰岛素纤维素
    A、AB、BC、CD、D

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    我国科学工作者曾成功地将分别属于两个科的植物--烟草和菠菜杂交，从而获得一种新型的烟草品种．在此过程中，下列哪项不是必需的（　　）
    A、原生质体融合前要先脱分化
    B、要诱导愈伤组织进行再分化
    C、杂交前要除去二者细胞的细胞壁
    D、原生质体融合后，要选出烟草--菠菜融合细胞加以培养

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