Question

回答下列关于基因工程的问题
如图1是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线，表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图2、图3中箭头表示相关限制酶的酶切位点．

限制酶	BamHⅠ	HindⅢ	EcoRⅠ	Sma
识别序列及切割位点

（1）若对图2中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性如何变化，为什么？

 

（2）图中将人乳铁蛋白基因插入质粒，可以只用EcoR I同时酶切质粒和人乳铁蛋白基因，也可以使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时酶切质粒和人乳铁蛋白基因，后一个方法的优点在于可以防止

 

．
（3）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入

 

酶．重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了

 

．
（4）图1过程①可采用的操作方法是

 

，过程②可采用的生物技术是

 

．过程③可采用的生物技术是

 

．
（5）分别从分子水平简述雌性转基因牛分泌人乳铁蛋白的过程是

 

．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,胚胎移植

专题：

分析：此题考查的技术手段有基因工程原理及技术和胚胎移植技术，图2、3代表的是根据质粒和目的基因的酶切位点选取所用限制酶，图1将目的基因导入受体细胞后进行胚胎移植产生能产生目的基因表达产物个体的过程．

解答： 解：（1）SmaⅠ识别的核苷酸序列为：，G和C之间可以形成三个氢键，A和T之间可以形成二个氢键，所以SmaⅠ酶切位点越多G、C含量越多，氢键越多，热稳定性就越高．
（2）只使用EcoR I，则质粒和目的基因两端的粘性末端相同，用连接酶连接时，会产生质粒和目的基因自身环化；而利用BamHⅠ和HindⅢ剪切时，质粒和目的基因两端的粘性末端不同，用DNA连接酶连接时，不会产生自身环化．
（3）DNA连接酶作用是连接DNA片段，在连接质粒和目的基因时用到，而质粒本身所携带的抗性基因的目的就是供重组质粒的鉴定和选择，所以答案是筛选．   
（4）过程①是将目的基因导入动物受精卵，所用方法是显微注射法；过程②是早期胚胎培养，需要利用的技术是动物细胞培养；过程③是将早期胚胎移入代孕母体中所用技术为胚胎移植．
（5）此题主要考查基因指导蛋白质合成过程，即通过DNA转录mRNA，再以mRNA为模板翻译出相关蛋白质．
故答案为：
（1）SmaⅠ识别的核苷酸序列为：，G和C之间可以形成三个氢键，A和T之间可以形成二个氢键，所以SmaⅠ酶切位点越多G、C含量越多，氢键越多，热稳定性就越高
（2）质粒和目的基因自身环化
（3）DNA连接酶        筛选
（4）显微注射法      动物细胞培养       胚胎移植
（5）DNA转录形成mRNA，再以mRNA为模板翻译出蛋白质

点评：此题考查内容较为基础，对于DNA稳定性和限制酶特点的联系考查，以及质粒作为运载体的条件和一些现代生物技术的应用，中心法则内容的概括等，这些主要是识记．