Question

17．自然界中的微生物往往是混杂生长的．人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定．下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题．步骤如下：
（1）制备稀释倍数为10²、10³、10⁴、10⁵、10⁶的系列稀释液．                  
（2）为了得到更加准确的结果，你选用稀释混合平板法（填“平板划线法”或“稀释涂布平板法”）接种样品．                           
 （3）适宜温度下培养．
①为测定大肠杆菌数，在对应稀释倍数为10⁶的培养基中，得到以下几种统计结果，正确可信的是D．                            
 A．一个平板，统计的菌落数是23                                        
 B．两个平板，统计的菌落数是22和26，取平均值24                         
C．三个平板，统计的菌落数分别为21、5和52，取平均值26                  
 D．四个平板，统计的菌落数分别是21、30、24和25，取平均值25               
 ②一同学在对应稀释倍数为10⁶的培养基中，测得平板上菌落数的平均值为23.4，那么每毫升样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL）1.17×10⁸．
③用这种方法测定密度，实际活菌数量要比测得的数量多，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察的是一个菌落．

Answer 1

分析 本题考查微生物的计数方法，可从两种接种方法的优缺点和统计菌落数目时应注意的问题入手解答该题．稀释混合平板法是将土壤悬液对号放入平皿，然后再倒入溶化后冷却45℃左右的培养基，边倒入边摇匀，使样品基中的微生物与培养基混合均匀，待冷凝成平板后，分别培养后，再挑取单个菌落，直接获得纯培养的方法．

解答 解：（2）稀释混合平板法是将土壤悬液对号放入平皿，然后再倒入溶化后冷却45℃左右的培养基，边倒入边摇匀，使样品基中的微生物与培养基混合均匀，待冷凝成平板后，分别培养后，再挑取单个菌落，直接获得纯培养，故稀释混合平板法结果更准确．
（3）①D中设有多个重复组，且实验结果相差不大，故D结果最可信．
②由于菌落数的平均值为23.4，稀释倍数是10⁶，所取稀释液的体积为0.2mL，故每毫升样品中的菌落数是23.4÷0.2×10⁶=1.17×10⁸．
③因为菌落可能由两个或多个细菌连在一起生长而成，所以实际活菌数量要比测得的数量多．
故答案为：
（2）稀释混合平板法
（3）①D   
②1.17×10⁸  
 ③多     当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察的是一个菌落

点评 本题的知识点是微生物培养过程，分离微生物和统计活菌数常用的常用方法，主要考查学生设计和完善实验步骤，分析实验结果获取结论的能力和提出问题进行进一步探究的能力，利用所学的微生物知识解决生活问题的能力．