Question

13．如图表示科学家培养转绿色荧光蛋白基因植物的过程，请回答：

（1）利用打孔器从烟草叶片上取多个大小相等的小圆片与重组农杆菌共培养一昼夜后，接种在含卡那霉素的培养基上，为筛选出被农杆菌感染的小圆片，作为运载体的Ti质粒应含有卡那霉素抗性基因，运载体上的启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点．为了将目的基因整合到烟草细胞的染色体（核DNA）上，以上DNA片段都必须在Ti质粒的T-DNA片段上．
（2）图中小圆片周围长出的结构A称为愈伤组织，此后更换培养基时调整组分比例．A经图中④长出B结构，此过程加入的植物激素主要是生长素和细胞分裂素．④和⑤过程称为再分化．本实验可使用特殊的仪器在A中检测目的基因的表达情况，请预测观察到的现象是（愈伤组织边缘或局部细胞）发出绿色荧光．

Answer 1

分析 分析题图：图示表示科学家培养转绿色荧光蛋白基因植物的过程，①是利用打孔器从植物叶片上取多个大小相等的小圆片；②是将植物小圆片与重组农杆菌共同培养；③表示脱分化过程，其中A为愈伤组织；④表示再分化过程，B为胚状体．

解答 解：（1）作为运载体的Ti质粒应含有标记基因，即卡那霉素抗性基因，以便于筛选出被农杆菌感染的小圆片；运载体上的启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点．农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上．为了将目的基因整合到烟草细胞的染色体（核DNA）上，以上DNA片段都必须在Ti质粒的T-DNA片段上．
（2）由以上分析可知，图中小圆片周围长出的结构A为愈伤组织；结构B为胚状体，A$\stackrel{④}{→}$B，该过程中需要加入生长素和细胞分裂素，再经⑤和⑥形成植株的过程称为再分化．用特殊的仪器在A中检测目的基因的表达情况，若目的基因（绿色荧光蛋白基因）已经成功导入受体细胞并表达，应该会观察绿色荧光．
故答案为：
（1）卡那霉素抗性基因    启动子    染色体（核DNA）      T-DNA
（2）愈伤组织      生长素和细胞分裂素       再分化     （愈伤组织边缘或局部细胞）发出绿色荧光

点评 本题结合转绿色荧光蛋白基因植物的培育过程图，考查基因工程、植物组织培养的相关知识，要求考生识记基因工程的操作步骤及各步骤所采用的方法，掌握农杆菌转化法的原理；识记植物组织培养过程，能准确判断图中各过程或各结构的名称．