Question

【题目】埃博拉病毒是一种强致病性RNA病毒，以埃博拉病毒外壳某蛋白为主要抗原制备疫苗和抗体是预防和诊疗埃博拉出血热的一种有效策略。其疫苗生产和抗体制备的流程之一如图：

（1）过程①需要在______________酶的催化下合成DNA，将获得的DNA与载体连接后导入受体菌群建立病毒的_________文库，再从中筛选出A基因。

（2）过程②利用PCR技术扩增A某因时，需在_________酶的作用下进行，PCR技术的原理是_________。

（3）过程③采用的技术手段是_________，获得的X是_________。

（4）可选用图中基因工程生产的_________所制备的疫苗注射到健康人体内，对埃博拉病毒进行免疫预防，对该传染病疑似患者确诊时，可从疑似患者体内分离病毒，与图中的_________进行特异性结合检测。

Answer 1

【答案】 逆转录 基因组 热稳定DNA聚合（Taq） DNA双链复制 动物细胞融合 杂交瘤细胞 A蛋白 抗A蛋白的单克隆抗体

【解析】试题分析：本题难度不大，综合性较强，考查了基因工程、单克隆抗体的制备、PCR技术、动物细胞培养等相关知识，要求学生生具有扎实的基础知识，并构建一定的知识网络。图示过程中，①表示逆转录形成DNA的过程；②表示获取A（目的）基因的过程；③表示细胞融合的过程，X为杂交瘤细胞。PCR技术的过程：高温变性、低温复性、中温延伸。条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。

（1）埃博拉病毒的遗传物质是RNA，过程①代表的是逆转录的过程，需要在逆转录酶的催化下合成DNA。基因文库是指将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入到受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因。基因组文库包含某种生物所有的基因；部分基因文库包含某种生物的部分基因。将获得的DNA与载体连接后导入受体菌群建立病毒的基因组文库，再从中筛选出A基因。

（2）利用PCR技术扩增A基因时，根据A基因两端的部分核苷酸序列设计引物序列，加入引物的作用是与A基因单链相应互补序列结合，然后在热稳定DNA聚合（Taq）作用下进行延伸。PCR技术所依据的原理是DNA双链复制。

（3）③过程需要采用动物细胞融合技术，根据图中信息可知X为杂交瘤细胞。

（4）图中的A蛋白相当于抗原，因此可选用图中基因工程生产的A蛋白所制备的疫苗对健康人进行该传染病进行免疫预防。对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒，与图中的抗A蛋白的单克隆抗体进行特异性结合检测。