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    【题目】治疗糖尿病首先要测定病人的血糖和胰岛素浓度。实验室中一般采用单克隆抗体对胰岛素含量进行测定。人抗胰岛素单克隆抗体的制备过程中，常给小鼠注射物质X。请回答下列问题：

    （1）对小鼠注射的物质X是_________，以便于从小鼠体内获取_________。

    （2）诱导动物细胞融合时常用的诱导因素有_________。细胞融合技术突破了_________的局限，使远缘杂交成为可能。

    （3）细胞融合实验完成后，融合体系中出现了多种类型的细胞，原因是__________________。未融合的B细胞经过多次传代培养后都不能存活，原因是_________。

    （4）若要大量制备人抗胰岛素单克隆抗体，可将获得的杂交瘤细胞注射到小鼠的_________中使其增殖，再从_________中提取、纯化获得。

    【答案】人的胰岛素 相应的B细胞 聚乙二醇（PEG）、电剌激和灭活的病毒 有性杂交 细胞融合是随机的，且不能全部融合 B细胞不能无限增殖 腹腔 腹水

    【解析】

    1、抗体：一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体，从血清中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。
    2、单克隆抗体的制备
    （1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞；

    （2）获得杂交瘤细胞：
    ①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；
    ②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。
    （3）克隆化培养和抗体检测；
    （4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖；
    （5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。
    3、单克隆抗体的应用
    （1）作为诊断试剂，具有准确、高效、简易、快速的优点；
    （2）用于治疗疾病和运载药物。

    （1）胰岛素单克隆抗体制备，首先需要将人胰岛素作为抗原注射到健康成熟小鼠体内，故对小鼠注射的物质X是是人胰岛素；其目的是获取能分泌抗人胰岛素抗体的B细胞，以便于从小鼠体内获取相应的B细胞。

    （2）诱导动物细胞融合时常用的诱导因素有聚乙二醇（PEG）、电剌激和灭活的病毒等；细胞融合技术使不同物种之间实现杂交，有性杂交的局限被突破，使远缘杂交成为可能。

    （3）由于细胞融合是随机的，且不能全部融合，所以细胞融合实验完成后，融合体系中出现了多种类型的细胞；因为未融合的B细胞不能无限增殖，只能分裂50-60次左右，所以未融合的B细胞经过多次传代培养后都不能存活。

    （4）若要大量制备人抗胰岛素单克隆抗体，会将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖，再从小鼠的腹水中提取分离，纯化获得单克隆抗体。

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