Question

萌发的禾谷类种子中淀粉酶的含量显著增高，主要有α－淀粉酶和β－淀粉酶。α－淀粉酶不耐酸、较耐热，在pH为3．6、0℃下可迅速失活，而β－淀粉酶耐酸、不耐热，在70℃条件下15min后失活。根据它们的这种特性，可分别测定一种酶的催化效率。某实验小组进行了“提取小麦种子中α－淀粉酶并测定α－淀粉酶催化淀粉水解的最适温度”等相关实验。

       实验材料：萌发3天的小麦种子（芽长约1cm）。

       主要试剂及仪器：1mg/mL的标准麦芽糖溶液、5%的可溶性淀粉溶液、碘液、蒸馏水、石英砂、恒温水浴锅等。

       实验步骤：

       步骤一：制备酶溶液。

 

       步骤二：略。

       步骤三：取 6支干净的、体积相同并具刻度的试管依次编号，按下表要求加入试剂，再观察各试管内的颜色变化（注：+表示碘液变蓝色，-表示碘液不变色）。

试管编号	1	2	3	4	5	6
5％的可溶性淀粉溶液（mL）	8	8	8	8	8	8
恒温水浴5min（℃）	0	20	40	60	80	100
α－淀粉酶保持活性而β－淀粉酶失去活性的溶液 （mL）	1	1	1	1	1	1
恒温水浴5min（℃）	0	20	40	60	80	100
溶液混合，振荡后恒温水浴5min（℃）	0	20	40	60	80	100
加入碘液，振荡后观察颜色变化	+++	++	+	-	++	+++

       请回答下列问题：

（1）资料表明：小麦种子发芽时，胚产生赤霉素，赤霉素扩散到糊粉层，诱导淀粉酶的合成。赤霉素诱导淀粉酶合成的主要机理是               。选用萌发的小麦种子提取酶液的主要理由是               。

（2）步骤二的具体操作是                                                                            。

（3）加入碘液，振荡后观察颜色变化，发现试管4中碘液不变色，能否据此推断α－淀粉酶的最适合温度一定是60℃？            。理由是                                    。该实验中不能选用斐林试剂检测实验结果的主要原因是                         。

（4）若要进一步研究小麦种子中β－淀粉酶的最适温度，则需获得β－淀粉酶保持活性而α－淀粉酶失活的酶溶液。请简要写出制备该种酶溶液的方法：                     。

Answer 1

（1）赤霉素诱导淀粉酶基因的表达   小麦种子（中含淀粉丰富，）萌发时形成大量淀粉酶   

    （2）将酶液置于70℃水浴中15min，取出后迅速冷却  

   （3）不一定    该实验只能说明60℃时该酶的活性比其他实验温度下高，而不能说明比40℃至80℃间的其他温度下活性高（或需进一步在40℃～80℃范围内设置温度梯度，比较其他温度与60℃时该酶的活性）    利用斐林试剂检测时需要水浴加热，会改变了该实验中的自变量（温度），影响实验最终结果  

   （4）将步骤一中制取的酶液置于pH为3．6、温度为0℃下的环境中短暂时间，使α－淀粉酶失去活性