下面是某校生物班同学在“生物技术实践课中进行的实验.请回答:A1．(1)分离纯化土壤中细菌最常使用的接种方法是和两种．在接种过程中.对接种器械的灭菌方法是．(2)一同学在纯化土壤中细菌的实验中.发现其培养基上的菌落连成一片.最可能的原因是 .应当怎样处理? ．(3)另一同学运用PCR技术.准备对分离得到的大肠杆菌一个DNA分子� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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下面是某校生物班同学在“生物技术实践”课中进行的实验，请回答：
A1．（1）分离纯化土壤中细菌最常使用的接种方法是

和

两种．在接种过程中，对接种器械的灭菌方法是

．
（2）一同学在纯化土壤中细菌的实验中，发现其培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是

，应当怎样处理？

．
（3）另一同学运用PCR技术，准备对分离得到的大肠杆菌一个DNA分子进行体外扩增．他往扩增仪中加入模板DNA、四种脱氧核苷酸，此外还应加入

和

．DNA体外扩增过程包括了三个连续的步骤分别是

、

和

．
A2．在日常生活中，我们经常使用到加酶洗衣粉．
（1）在某加酶洗衣粉的使用说明里，有以下几点：①不能用于洗涤丝毛织物 ②最好用45℃的温水洗涤 ③存放时间不宜太长
请你分析上述三点的原因．

．
（2）为什么用加酶洗衣粉比用普通洗衣粉更有利于环境保护？

．

考点：微生物的分离和培养,脂肪酶、蛋白酶的洗涤效果,PCR技术的基本操作和应用

专题：

分析：1、平板划线法和稀释涂布平板法是微生物接种常用的两种方法．
2、PCR技术包括变性、复性和延伸三个阶段．
3、酶的特性具有高效性、专一性、和作用条件较温和．

解答： 解：A1．（1）平板划线法和稀释涂布平板法是微生物接种常用的两种方法，接种中要用灼烧灭菌对接种环灭菌．
（2）由于微生物分离最终在培养基上得到的是由单个细菌繁殖而来的菌落，当培养基上的菌落连成一片，说明在稀释菌液时，稀释度不够，造成菌液浓度过高，出现这样的现象．
（3）PCR技术是对DNA分子进行体外扩增，除了DNA复制所需要的模板、四种脱氧核苷酸，还要加入DNA聚合酶、引物，扩增包括变性、复性和延伸三个阶段．
A2．（1）由于酶具有高效性、专一性、和作用条件较温和，故在使用时往往具有一些特殊的要求，具体原因有不能用于洗涤丝毛织物，因为加酶洗衣粉含有蛋白酶，能将丝毛织物中的蛋白质分解，加酶洗衣粉中的酶在45℃时催化活性最高，洗衣效果最好，存放时间过长，会使加酶洗衣粉中的酶活性降低，影响洗衣效果．
（2）由于普通洗衣粉含有磷元素，在洗涤时，会造成环境污染，而加酶洗衣粉无磷或低磷，与普通洗衣粉相比，能减少含磷污水对环境的污染．
故答案为：
A1．（1）平板划线法    稀释涂布平板法    灼烧灭菌
（2）菌液浓度过高   增大稀释倍数
（3）DNA聚合酶   引物   变性   复性    延伸
A2．（1）加酶洗衣粉含有蛋白酶，能将丝毛织物中的蛋白质分解；加酶洗衣粉中的酶在45℃时催化活性最高，洗衣效果最好；存放时间过长，会使加酶洗衣粉中的酶活性降低，影响洗衣效果．
（2）加酶洗衣粉无磷或低磷，与普通洗衣粉相比，能减少含磷污水对环境的污染

点评：本题主要考查微生物的分离、加酶洗衣粉的应用等相关知识，意在考查考生对选修一上的实验的掌握程度，理论联系实际的能力．

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某科技小组在调查一块方圆为2hm²的草场中灰苍鼠的数量时，放置了100个捕鼠笼，一夜间捕获了50只，将捕获的灰苍鼠做好标记后在原地放生．5天后，在同一地点再放置同样数量的捕鼠笼，捕获的灰苍鼠中有上次标记的个体13只，还有39只没有标志．由于灰苍鼠被捕一次后更难捕捉，因此推测该草场中灰苍鼠的种群数量最可能（　　）

A、小于150只

B、大于150只

C、小于200只

D、大于200只

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基因工程中选用的细菌质粒常带有抗生素抗性基因，该基因的主要作用是（　　）

A、提高受体细胞在自然环境中的耐药性

B、有利于对目的基因是否导入进行检测

C、有利于对目的基因是否表达进行检测

D、有利于对目的基因的表达

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分析回答下列有关生物技术实践方面的问题：
（一）微生物的培养技术在工农业、医疗卫生等领域有着广泛的应用．表为某微生物培养基的配方，请回答：

成分	含量
NaNO₃	3g
K₂HPO₄	1g
KCl	0.5g
MgSO₄?7H₂O	0.5g
FeSO₄	0.01g
（CH₂O）	30g
H₂O	1 000ml
青霉素	0.1万单位

（1）依用途划分，该培养基属于

培养基．
（2）根据培养基的成分，推测所培养的微生物可能是

A．尿素分解菌 B．霉菌或酵母菌 C．病毒 D．蓝藻
（3）配制培养基时，在各成分溶化后分装前，需要做的工作是

．如果要鉴别自来水中大肠杆菌是否超标，至少还要加入琼脂和伊红-美蓝，并且除去

．
（4）若要通过稀释涂布平板法分离纯化土壤中的微生物，其正确操作步骤是

①土壤取样 ②称取10g土壤加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中制备水壤提取液 ③吸取0.1mL进行平板涂布 ④依次稀释至10¹、10²、10³、10⁴、10⁵、10⁶、10⁷的稀释度
A．①②③④B．①③②④C．①②④③D．①④②③
（二）酶在生产和生活中有着广泛的应用．回答下面有关酶应用的有关问题：
（1）如果手头有两种外观一致又没有包装的加酶洗衣粉，其中一种只含一种水解酶，另一种含有多种水解酶（已知不同水解酶的相对分子质量不同），生物老师根据洗衣粉中酶（蛋白质）与其他成分的不同理化性质，先除去洗衣粉中的非蛋白质的成分，请你再运用你学过的一种生物技术帮助老师把两种洗衣粉区分出来（只要求说出方法名称及其简单原理即可）：

．
（2）如果分别用等量的不同温度的水（从0°C～90°C）分别溶入加酶洗衣粉（含蛋白酶）来洗涤等量的有陈旧牛奶渍的棉质衣服，其洗涤效果用下列的哪一个坐标曲线图来表示较合适（横轴表示温度，纵轴表示洗涤效果）？答：

图．

（3）应用果胶酶能够提高果汁产品的产量和品质．若上图横轴表示果胶酶的用量，纵轴表示果汁的产量，则在原材料有限的情况下，能正确表示相同时间内果胶酶的用量对果汁产量影响的是上面的

图．
（4）要想提高酶的利用效率，可以使用固定化酶技术．下面有关该技术的说法中，正确的是

A．物理吸附法的优点是操作简单，吸附牢固
B．物理吸附法容易对酶活性产生影响
C．包埋法的优点是操作复杂，条件温和，对细胞无毒毒性
D．凝胶包埋常用的凝胶种类有琼胶糖、海藻酸钠、醋酸纤维素、明胶和聚丙烯酰胺等．

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下列是有关微生物的培养与应用等问题，请分析回答．
（1）图示利用

法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步

分散到培养基的表面，为达到这一目的，操作上应注意：

．
（2）制备培养基的操作顺序是

．（用下列字母排序）
a．倒置培养基 b．计算c．溶化d．称量e．灭菌
（3）现有5种酵母菌的营养缺陷型菌株1、2、3、4、5，它们不能合成生长所必需的物质G，已知A、B、C、D、E都是合成G物质的必需中间产物，但不知这些物质合成的顺序，于是在培养基中分别加入这几种物质并分析了这几种物质对各种营养缺陷型菌株生长的影响，结果如下表所示．