某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌．分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明.乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙．回答下列问题:(1)分离纯化乳酸菌时.首先箝要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释．梯度稀释的目的是泡菜滤液中乳酸菌的浓度高.直接分离很难分离到单个菌落(为了聚集在一起的微生物分散成单个细胞.从而能在培养� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

精英家教网 > 高中生物 > 题目详情

11．某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌．分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙．回答下列问题：
（1）分离纯化乳酸菌时，首先箝要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释．梯度稀释的目的是泡菜滤液中乳酸菌的浓度高，直接分离很难分离到单个菌落（为了聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落）．
（2）推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用除了可以中和产生的乳酸以外，还可以鉴别乳酸菌．分离纯化时应挑选出具有透明圈的菌落作为候选菌．
（3）若该同学采用稀释涂布平板法来检测泡菜滤液中乳酸菌的含量，先将lmL泡菜滤液稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0．lmL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37．据此可得出每毫升滤液中的活菌数为3.8×10⁴个．
（4）若对筛选得到的乳酸菌进一步纯化，宜采用的纯化方法是平板划线法．乳酸菌在20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的甘油．

分析 1、稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数时，在每一个梯度浓度内，至少要涂布3个平板，选择菌落数在30～300的进行记数，求起平均值，再通过计算得出土壤中细菌总数．
2、泡菜发酵的实验原理：
（1）乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸．
（2）利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化．
温度过高，食盐用量不足10%、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加．一般在腌制10天后，亚硝酸盐的含量开始下降．
（3）测定亚硝酸盐含量的原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，与已知浓度的标准显色液目测比较，估算泡菜中亚硝酸盐含量．

解答解：（1）分离纯化乳酸菌时，首先要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释．泡菜滤液中乳酸菌的浓度高，直接分离很难分离到单个菌落，因此需要对泡菜滤液进行梯度稀释．
（2）在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用是中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸和利于乳酸菌的识别和分离；分离纯化时应挑选出在平板上有透明圈的菌落作为候选菌．
（3）若该同学采用稀释涂布平板法来检测泡菜滤液中乳酸菌的含量，先将lmL泡菜滤液稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0．lmL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37．据此可得出每毫升滤液中的活菌数为=（39+38+37）÷3÷0.1×100=3.8×10⁴个．
（4）若对筛选得到的乳酸菌进一步纯化，宜采用的纯化方法是平板划线法．乳酸菌在20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的甘油．
故答案为：
（1）泡菜滤液中乳酸菌的浓度高，直接分离很难分离到单个菌落（为了聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落）
（2）鉴别乳酸菌具有透明圈
（3）3.8×10⁴
（4）平板划线法甘油

点评本题考查微生物的分离与培养以及泡菜制作的相关知识，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验选用的材料、实验采用的试剂及试剂的作用、实验现象等，需要考生在平时的学习过程中注意积累．

练习册系列答案

火辣英语初中阅读理解与完形填空系列答案

交大之星现代文经典阅读300题系列答案

金牌阅读系列答案

锦绣文章系列答案