Question

【题目】（一）某村庄有一条小溪，近几年由于上游几家乳胶厂不断向其中排放废水，小溪变得不再清澈。某同学想测定该溪水中的细菌含量情况。回答下列问题：

（1）先根据所学知识制备LB培养基。制备该培养基的步骤是：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板，下列关于制备LB培养基的叙述，错误的是____

A.培养基应先调pH再进行灭菌

B.培养基应先灭菌再分装到培养皿

C.溶化琼脂时不能使培养基溢出或烧焦

D.灭菌时一般用高压蒸汽灭菌锅在121℃，500g/cm2压力下灭菌15分钟

（2）该同学利用上述制备的培养基来检测水样中的细菌数量，他所选择的分离方法应是_____；该同学在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是____。接种在超净工作台上进行，工作台上实验前一段时间需打开，实验中需关闭的是______（A.酒精灯 B.照明灯 C.紫外线 D.过滤风）

（3）值得注意的是，他所选择的这种方法统计的结果往往比实际细菌的数目要低，这是因为①______②_______（不考虑实验操作原因引起的细菌数目的变化）

（4）该同学欲将所分离出的某种细菌临时保藏，应接种到试管的______培养基上，等菌落长成后，放入冰箱低温保藏。

（二）回答有关胚胎工程的问题。

（1）“二娃”政策实施后，一些高龄夫妇选择“试管婴儿”技术孕育二胎：要使精子和卵细胞在体外成功融合，首先须采集到成熟的卵细胞，最常用的方法是卵巢经过_______处理后，使用超声监视器确定卵泡的位置，插入穿刺针吸取卵泡液，取出_______，在体外进行人工培养，促进其成熟。同时对于男方提供的精子，须经系列处理与培养，以达到_______状态。受精卵形成后，经人工培养至_______阶段，借助胚胎移植技术回输至女方体内，经过自然孕育，即得试管婴儿。

（2）胚胎干细胞研究发展前景诱人，它具有发育全能性和二倍体核型。培养胚胎干细胞的培养基中，必须加入胰岛素、葡萄糖、_______等成分。并且要将干细胞接种在饲养层上，用于饲养层的细胞一般是_______。

（3）下列有关胚胎移植的说法错误的是_______

A．供体与受体是同一物种的雌性

B．受体与供体保持相同的的生理状态

C．供体胚胎与受体子宫建立正常的生理和组织联系

D.多胚胎移植在提高妊娠率的同时，常可获得性状完全相同的孩子

Answer 1

【答案】 D （稀释）涂布分离法 检查平板灭菌是否彻底 C ①该方法只能统计样品中活菌的数目，死菌无法统计 ②当两或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 斜面 超数排卵 卵母细胞 【答题空10】获能 早期囊胚 动物血清 胚胎成纤维细胞 D

【解析】本题考查微生物培养与应用、胚胎移植等知识，要求考生理解相关知识的要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力。

（一）（1）要想测定该溪水中的细菌含量情况，需先根据所学知识制备LB培养基，制备该培养基的步骤是：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板；制备LB培养基时，培养基应先调pH再进行灭菌，A正确；培养基应先灭菌再分装到培养皿，B正确；溶化琼脂时不能使培养基溢出或烧焦，C正确；灭菌时一般用高压蒸汽灭菌锅在121℃，100kPa压力下维持15-30分钟，D错误。

（2）用上述制备的培养基来检测水样中的细菌数量时，选择的分离方法应是稀释涂布分离法；在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是检查平板灭菌是否彻底。接种在超净工作台上进行，工作台上实验前一段时间需打开，实验中需关闭紫外线，以防止对人体造成伤害。

（3）稀释涂布分离法检测水样中的细菌数量时，由于①该方法只能统计样品中活菌的数目，死菌无法统计，②当两或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，导致统计的结果往往比实际细菌的数目要低。

（4）临时保藏菌种时，应将菌种接种到试管的斜面培养基上，等菌落长成后，放入冰箱低温保藏。

（二）（1）高龄夫妇选择“试管婴儿”技术孕育二胎时：要使精子和卵细胞在体外成功融合，首先须采集到成熟的卵细胞，最常用的方法是卵巢经过超数排卵处理后，使用超声监视器确定卵泡的位置，插入穿刺针吸取卵泡液，取出（次级）卵母细胞，在体外进行人工培养，促进其成熟。同时对于男方提供的精子，须经系列处理与培养，以达到获能状态。受精卵形成后，经人工培养至8细胞到早期囊胚阶段，借助胚胎移植技术回输至女方体内，经过自然孕育，即得试管婴儿。

（2）培养胚胎干细胞的培养基中，必须加入胰岛素、葡萄糖、动物血清等成分，并且要将干细胞接种在饲养层上，用于饲养层的细胞一般是胚胎成纤维细胞。

（3）胚胎移植时，供体与受体应该是同一物种的雌性个体，A正确；受体与供体应保持相同的的生理状态，B正确；供体胚胎与受体子宫需建立正常的生理和组织联系，C正确；多胚胎移植可提高妊娠率的同时，但移植的多个胚胎性别不一定相同，性状也有差异，D错误。