Question

3．家蚕细胞具有高效表达外源基因能力．将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药．下列说法不正确的是（　　）

• A． 家蚕细胞培养所需二氧化碳的主要作用是维持培养液的pH
• B． 来自cDNA文库的干扰素基因片段构建表达载体时前端必须插入人的启动子
• C． 采用PCR技术扩增干扰素基因的实验中是以干扰素基因为模板
• D． 进行转基因操作前，需用胶原蛋白酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞

Answer 1

分析 1、PCR技术的条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）．
2、基因表达载体的组成包括启动子、终止子、目的基因、标记基因等．
3、动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养．4、动物细胞培养条件：
（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物．
（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．
（3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4．
（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO₂（维持培养液的PH）．

解答 解：A、动物细胞培养所需二氧化碳的主要作用是维持培养液的pH，A正确；
B、利用家蚕生成干扰素时，来自cDNA文库的干扰素基因片段构建表达载体时前端必须插入家蚕的启动子，而不是人的启动子，B错误；
C、采用PCR技术扩增干扰素基因的实验中是以干扰素基因为模板，C正确；
D、进行转基因操作前，需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞，D正确．
故选：B．

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节；识记动物细胞培养的过程及条件，能结合所学的知识准确判断各选项．