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    为了从动物组织中提取纯净的DNA，首先要快速、有效地消化裂解动物组织细胞。消化裂解动物组织常用的方法有蛋白酶（如蛋白酶K）水解、表面活性剂处理、变性剂处理等。某科研人员拟使用加酶洗衣粉消化裂解猪肌肉样本，并提取猪的DNA。实验步骤如下：

    ①取500mg剪碎的猪肌肉组织于离心管中，加40mg加酶洗衣粉和1.5mL超纯水混合，在一定温度条件下水浴消化24h。

    ②加入苯酚、氯仿、异丙醇(25:24:1)混合液抽提。

    ③加0.2mg/mL的RNA水解酶于37。C水浴th。

    ④加醋酸钠和无水乙醇，4cc高速离心15min。

    ⑤用70qo乙醇洗涤沉淀两次，风干，得到高纯度的DNA。

    请回答有关问题：

    （1）加酶洗衣粉可以消化裂解动物组织细胞的原理是 。

    （2）步骤②的目的是 。步骤③的目的是 。

    （3）步骤④中使用无水乙醇的目的是 ，高速离心时温度保持在4℃的原因有 、 等。

    （4）如果要将加酶洗衣粉法提取DNA与蛋白酶K法提取DNA的效果进行对比，请简要说明实验设计思路。 。

    （5）若是从血细胞中提取DNA，则选择 （选填“鸡血”或“哺乳动物红细胞”）。破碎细胞时，向血细胞液中加入一定量的 ，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。

     

    （1）洗衣粉中蛋白酶和表面活性剂等可以破坏细胞膜

    （2）使蛋白质变性，抽提蛋白质 水解RNA

    （3）析出DNA，提取含杂质较少的DNA 降低核酸水解酶的活性，防止DNA降解

    降低分子运动，易于形成沉淀析出（增加DNA分子的柔韧性，减少断裂）

    （4）将上述实验步骤中的加酶洗衣粉换成蛋白酶K，其他实验步骤相同，得到DNA后，测定DNA的量、纯度

    （5）鸡血 蒸馏水

    【解析】

    试题分析：

    （1）细胞膜被破坏可导致细胞裂解，由于细胞膜中含有蛋白质，所以蛋白酶可以促进细胞裂解，另外，表面活性剂也可以破坏细胞膜。

    （2）苯酚、氯仿、异丙醇混合液可以促进蛋白质变性，便于抽提；RNA水解酶可以水解RNA。

    （3）DNA在无水乙醇中的溶解度很低，利用无水乙醇可以析出纯度更高的DNA；高速离心时要保持低温，原因是：可以降低水解酶的活性，防止DNA被水解；还可以降低分子运动，易于形成沉淀析出。

    （4）实验目的是研究蛋白酶K提取DNA的效果，因此应将上述实验中的加酶洗衣粉换成蛋白酶K，其他实验步骤相同，得到DNA后，测定DNA的量、纯度。

    （5）因为哺乳动物的成熟的红细胞无细胞核，不能提取出DNA分子，因此应选用鸡血；破碎细胞时，可以加入一定量的蒸馏水，细胞会吸水涨破，内容物流出。

    考点：本题考查DNA的提取的有关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力；具备验证简单生物学事实的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理。

     

    练习册系列答案
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    观察分析下图，该图表示的过程是(　　)

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    C．构建基因表达载体 D．构建转基因工程菌

     

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    (1)绿色荧光蛋白基因在该实验中是作为________基因。图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制酶切取目的基因和质粒。限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后形成的黏性末端：______________。

    (2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是______________________________________________________________。

    (3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是_________________________________________。

    (4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是(用数字表示)________________。

    ①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸

    ②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列

    ③蓝色荧光蛋白基因的修饰(合成)

    ④表达出蓝色荧光蛋白

     

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    试管婴儿、试管苗和克隆羊三者均属于生物工程技术的杰出成果，下列叙述正确的是

    A．都属于无性生殖，能保持母本性状

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    C．都充分体现了体细胞的全能性

    D．都不会发生基因重组和变异

     

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    科学家已能运用基因工程技术，让羊的乳腺合成并分泌人体某些种类的抗体，以下叙述不正确的是

    A．该技术可导致定向变异

    B．表达载体中需要加入乳腺蛋白的特异性启动子

    C．目的基因是抗原合成基因

    D．受精卵是理想的受体细胞

     

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    （1）图A表示通过细胞分泌的化学物质，随血液到达全身各处，与靶细胞表面的②________结合，将信息传递给靶细胞。

    （2）图B表示通过相邻两细胞的________，使信息从一个细胞传递给另一个细胞，图中③表示________。

    （3）图C表示相邻两植物细胞之间形成________，携带信息的物质从一个细胞传递给另一个细胞，图中④表示 。

    （4）精子和卵细胞之间的识别和结合是上图中图________所示的信息交流方式。在细胞免疫中，效应T细胞与靶细胞间信息交流是上图中图________所示的信息交流方式。

    （5）细胞膜除了可以实现信息交流之外，还可以控制物质进出。细胞膜具有选择透过性的分子基础是_____________具有疏水性和______________具有专一性。

     

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